高壓氧對創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后大鼠生存率的影響.pdf

1、目的: 整體上系統(tǒng)性的研究高壓氧對創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后的作用，觀察高壓氧對創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后大鼠的氧化-抗氧化系統(tǒng)、炎癥反應(yīng)、組織代謝與形態(tài)學(xué)變化以及生存率的影響，并探討其機制。 材料與方法: 一、動物分組 Wistar大白鼠完全隨機分成兩大組。第一大組96只，再完全隨機分成四組，每組24只大鼠：對照組(只進行手術(shù)操作，不誘導(dǎo)休克)；休克組(手術(shù)操作誘導(dǎo)休克并進行常規(guī)補血、補液復(fù)蘇)；高壓氧一次組(手術(shù)誘導(dǎo)休克

2、并進行常規(guī)補血、補液復(fù)蘇，復(fù)蘇結(jié)束后立即送入高壓氧艙，24小時內(nèi)實施一次高壓氧)；高壓氧三次組(除與高壓氧一次組相同的操作外，24小時內(nèi)再行兩次高壓氧)。這一大組大鼠用來按時間點取標(biāo)本并進行生化指標(biāo)檢測和病理檢查。第二大組40只，也完全隨機分成四組，每組10只大鼠：對照組，休克組，高壓氧一次組，高壓氧三次組。每組的操作均與第一大組中的相同。這一大組大鼠用來計算24、36、48和72小時的生存率。 二、創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇動物模型的建立

3、 大白鼠麻醉成功后平臥固定，手術(shù)暴露血管，右股動脈插入套管針，連接血壓換能器并與多參數(shù)監(jiān)護儀相連，監(jiān)測血壓；左頸內(nèi)靜脈插入套管針作為復(fù)蘇通路；右頸總動脈也插入套管針，用來進行放血。用鐵塊從高處垂直落下砸中左側(cè)大腿，造成股骨骨折和肌肉組織擠壓傷。同時通過右頸動脈插管放血，使血壓下降造成休克。休克狀態(tài)60分鐘后，將全部放出的自體血經(jīng)左頸內(nèi)靜脈回輸，同時用生理鹽水復(fù)蘇60分鐘。復(fù)蘇后使平均動脈壓維持于70～80mmHg以上。

4、三、高壓氧的實施 將大鼠放入氧艙后，先洗艙三次，然后將艙內(nèi)治療壓力勻速升至0.15MPa且氧濃度大于99.5％，維持恒定的艙內(nèi)壓力和氧濃度共60分鐘。最后等速減壓，艙內(nèi)壓力為0MPa后取出大鼠。 四、生化指標(biāo)檢測 根據(jù)休克前、休克后、復(fù)蘇后及24小時后這四個時間點將第一大組中每個組的大鼠再分為四個亞組，每組6只。每個亞組的大鼠按照其對應(yīng)的時間點進行采血取血漿。檢測血漿誘生型一氧化氮合酶(iNOS)和SOD的活性以

5、及血漿TNF-α、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸的含量。 五、病理學(xué)檢查 將24小時后時間點的大鼠活殺取標(biāo)本，留取部分左肺下葉、肝左葉、末端回腸和左腎，標(biāo)本經(jīng)固定、切片、染色后，常規(guī)病理學(xué)光鏡檢查，并進行病理評分。 六、生存率計算 將第二大組的40只大鼠隨機分成四組，每組10只：對照組、休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組。每組的操作均與第一大組中的相同。所有大鼠術(shù)后置于棉被中25℃下觀察72小時

6、，記錄生存時間，計算24、36、48、72小時的生存率。 七、統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS13.0 For Windows軟件處理數(shù)據(jù)。生化指標(biāo)和病理評分的數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示，采用單因素方差分析，組間比較采用SNK-q檢驗。相關(guān)性分析采用雙變量Pearson相關(guān)分析。生存率通過壽命表法計算，數(shù)據(jù)以生存率±標(biāo)準(zhǔn)誤(P±Sp)表示，組間生存率的比較采用Log-Rank檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

7、結(jié)果: 一、血漿SOD活性變化比較 24小時后休克組的血漿SOD活性值顯著低子對照組，高壓氧一次組和三次組血漿SOD活性值均高于對照組和休克組，其中與對照組的差異均不顯著，而與休克組間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。僅管高壓氧三次組高于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 二、血漿MDA含量變化比較 24小時后休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組的血漿MDA含量均顯著高于對照組，高壓氧一次組和三次組的血漿MD

8、A含量均顯著低于休克組。僅管高壓氧三次組略低于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 三、血漿TNF-α含量變化比較 24小時后休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組的血漿TNF-α含量均顯著高于對照組，高壓氧一次組和三次組的血漿TNF-α含量均顯著低于休克組。僅管高壓氧三次組略低于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 四、血漿NO含量變化比較 24小時后休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組的血漿

9、NO含量均顯著高于對照組，高壓氧一次組和三次組的血漿NO含量均顯著低于休克組。僅管高壓氧三次組略低于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 五、血漿iNOS活性變化比較 24小時后休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組的血漿iNOS活性值均顯著高于對照組，高壓氧一次組和三次組的血漿iNOS活性值均顯著低于休克組。僅管高壓氧三次組略低于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 六、大鼠血漿iNOS活性與NO含

10、量的相關(guān)性分析大鼠血漿iNOS活性與NO含量兩者之間存在顯著的正相關(guān)關(guān)系。 七、血漿乳酸含量變化比較 24小時后休克組、高壓氧一次組和高壓氧三次組的血漿乳酸含量均顯著高于對照組，高壓氧一次組和三次組的血漿乳酸含量均顯著低于休克組。僅管高壓氧三次組低于高壓氧一次組，兩者間的差異卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 八、病理損傷評分 對照組的大鼠肺臟、小腸、肝臟、腎臟病理損傷評分均顯著低于其它三組，而休克組的大鼠肺臟、小腸、肝

11、臟、腎臟病理損傷評分均顯著高于高壓氧一次組和三次組，高壓氧三次組的肺臟、小腸、肝臟、腎臟病理損傷評分均低于高壓氧一次組，但是差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。 九、生存率比較 對照組大鼠的生存率72小時內(nèi)維持于1.00，而其他三組的生存率均呈下降趨勢。休克組在24、36、48、72小時的生存率均顯著低于其他三組，高壓氧三次組在24、36、48、72小時的生存率均高于高壓氧一次組，但是差異均沒有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論： 基于

12、高壓氧的作用機制，本研究發(fā)現(xiàn)高壓氧能夠改善創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后組織的氧供，減輕無氧代謝，同時還可以提高機體自由基清除劑的活性，減輕自由基造成的損傷，尤其是減輕脂質(zhì)過氧化的程度。高壓氧可以減少創(chuàng)傷性休克后炎性細胞因子的產(chǎn)生，從而減輕過度的炎癥反應(yīng)。高壓氧也能改善各個臟器組織的病理損傷。綜合高壓氧以上的有益作用，可以在創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后整體生存率的顯著提高上得以反映。本研究進一步發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷性休克復(fù)蘇后24小時內(nèi)實施三次高壓氧的效果有好于一次高壓氧的