Stefin A在食管鱗癌組織和細(xì)胞中作用的初步研究.pdf

1、惡性腫瘤最重要的特征在于能侵襲周圍組織并發(fā)生轉(zhuǎn)移。腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移通常是造成腫瘤患者死亡的主要原因。組織蛋白酶B（cathepsin B）參與腫瘤從非惡性狀態(tài)進(jìn)展到惡性狀態(tài)，以及腫瘤生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成。作為組織蛋白酶 B的內(nèi)源性抑制劑，stefin A 表達(dá)水平與腫瘤惡性進(jìn)展的逆向關(guān)系的報(bào)道越來越多。 本研究的目的是分析stefin A在人食管鱗癌組織和細(xì)胞中的作用，并進(jìn)一步評(píng)價(jià)stefin A用于腫瘤治療的可能性。對(duì)62

2、例配對(duì)食管鱗癌組織標(biāo)本的免疫組織化學(xué)和半定量RT-PCR分析表明，與配對(duì)正常食管粘膜上皮組織相比，stefin A表達(dá)明顯下調(diào)，這與以往的cDNA微陣列的分析結(jié)果一致。共聚焦成像分析證實(shí)了stefin A 和組織蛋白酶 B的共定位。 隨后，我們穩(wěn)定轉(zhuǎn)染stefin A cDNA到人EC9706食管鱗癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變大，生長(zhǎng)減慢，組織蛋白酶 B活性明顯降低，Matrigel侵襲被明顯抑制，與Matrigel的粘附得到增強(qiáng)，緩解了

3、順鉑誘導(dǎo)的凋亡。同時(shí)，我們也評(píng)價(jià)了組織蛋白酶 B特異性抑制劑CA074Me對(duì)EC9706細(xì)胞的效果。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，10mM CA074Me也明顯抑制了EC9706細(xì)胞的組織蛋白酶 B活性和Matrigel侵襲。聯(lián)合10mM的CA074Me與stefin A轉(zhuǎn)染進(jìn)一步降低了組織蛋白酶 B的活性和抑制了Matrigel侵襲。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，過表達(dá)stefin A延緩了EC9706細(xì)胞在裸鼠的增殖；在裸鼠接種的腫瘤中明顯減低VIII因子染