高血壓模型內(nèi)皮一型環(huán)氧化酶對血壓和血管功能的調(diào)控和機制.pdf

1、背景與目的：
　　高血壓病嚴重影響心、腦、腎等重要器官的結(jié)構(gòu)和功能，進而危害人類健康，已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織確認為導致心血管疾病死亡的主要原因之一。環(huán)氧化酶(COX)代謝花生四烯酸(arachidonic acid，AA)產(chǎn)生血管活性前列腺素類物質(zhì)，其中前列環(huán)素(Prostacyclin，PGI2)與血管的舒縮效應(yīng)有密切關(guān)系。目前普遍認為，PGI2主要由血管內(nèi)皮的COX-2介導產(chǎn)生，并作用于前列環(huán)素受體(IP受體)發(fā)揮舒張血管和抗血小

2、板作用。然而，本實驗室早前研究結(jié)果表明在生理狀態(tài)下，心血管系統(tǒng)內(nèi)PGI2主要來源于COX-1。在某些血管中如小鼠的腹主動脈及豬腎葉間動脈，PGI2主要引起收縮反應(yīng)而不誘發(fā)舒張效應(yīng)。進一步研究顯示，PGI2可同時作用于IP受體和血栓烷素受體(TP受體)，在IP受體功能缺失或低表達的血管，PGI2主要作用于TP受體誘發(fā)內(nèi)皮依賴性的收縮反應(yīng)。然而，在疾病狀態(tài)下PGI2是否也是主要來源于COX-1尚待進一步澄清。因此，本研究的目的是進一步闡明高

3、血壓疾病狀態(tài)下，COX-1基因敲除或COX-1抑制劑對其發(fā)生和發(fā)展的影響，并明確COX-1介導產(chǎn)生的血管內(nèi)皮PGI2在高血壓血管功能調(diào)控中的作用及可能機制。
　　材料與方法：
　　本實驗采用8至12周齡、體重25g左右的健康雄性無特定病原體(SPF)級C57BL/6小鼠和同基因型背景的COX-1基因敲除(COX-1-/-)小鼠，構(gòu)建了兩腎一夾(Two-Kidney, one-clip，2K1C)高血壓模型。用尾套加壓法測量清

4、醒狀態(tài)下假手術(shù)組和模型組小鼠的動脈血壓，選取術(shù)后第27天收縮壓大于140mmHg的小鼠作為高血壓小鼠。術(shù)后第28天處死小鼠，稱取體重、心臟和雙側(cè)腎臟重量，計算心臟和雙側(cè)腎臟與體重的比值(mg/g)；HE染色法觀察對照組和模型組的心臟和腎臟及其血管形態(tài)結(jié)構(gòu)改變；Elisa方法測定頸動脈PGI2代謝產(chǎn)物6-Keto-PGF1α的含量；血管環(huán)張力檢測系統(tǒng)檢測乙酰膽堿(ACh)和花生四烯酸(AA)誘導離體小鼠腹主動脈、腎動脈以及頸動脈的血管反應(yīng)

5、性。
　　結(jié)果：
　　在2K1C高血壓病模型：
　　1.在術(shù)后第28天，相對于C57BL/6-Sham組(108.71±2.35mmHg)，C57BL/6-2K1C組(151.43±3.26mmHg)和COX-1-/--2K1C組(133.43±2.25mmHg)小鼠的動脈血壓均明顯升高，然而COX-1-/--2K1C組血壓上升幅度與C57BL/6-2K1C組相比明顯減弱。
　　2.在術(shù)后第28天，三組小鼠之間的

6、體重沒有顯著差異。與C57BL/6-Sham組相比， C57BL/6-2K1C組小鼠心臟重量、非夾側(cè)腎臟重量、心臟體重比及非夾側(cè)腎臟體重比均明顯升高，而夾側(cè)腎臟重量和夾側(cè)腎臟體重比均明顯降低；COX-1-/--2K1C組的變化趨勢與C57BL/6-2K1C組相似但幅度明顯減弱。
　　3. HE染色發(fā)現(xiàn)，C57BL/6-2K1C組小鼠心肌纖維增粗，夾側(cè)腎臟部分腎小球出現(xiàn)萎縮，非夾側(cè)腎臟腎小球出現(xiàn)代償性增大，而COX-1-/--2K1

7、C組病理改變未及C57BL/6-2K1C組明顯。
　　4.在2K1C高血壓小鼠腹主動脈、及一些外周血管，如腎動脈、頸動脈中，內(nèi)皮受體激動劑乙酰膽堿誘發(fā)及花生四烯酸所引起的血管收縮效應(yīng)，被COX-1基因敲除或COX-1抑制劑消除。
　　5.在2K1C高血壓小鼠頸動脈中，內(nèi)皮受體激動劑乙酰膽堿誘發(fā) PGI2代謝產(chǎn)物6-Keto-PGF1?合成增加，但此作用被COX-1抑制劑所消除。
　　結(jié)論：
　　1.成功構(gòu)建了小鼠