擬南芥CKL-3基因T-DNA插入突變體功能分析.pdf

1、酪蛋白激酶(casein kinase)屬于絲/蘇氨酸蛋白激酶，在物種間和組織分布的很廣泛，包括了CK1和CK2兩大亞類。它是通過蛋白磷酸化而改變其活性的一類激酶。蛋白質(zhì)磷酸化是生物體內(nèi)蛋白質(zhì)功能調(diào)節(jié)的重要方式。由于編碼激酶/磷酸酶的基因之間存在功能重疊現(xiàn)象，大多數(shù)磷酸酶的功能以及蛋白磷酸化與信號傳導(dǎo)途徑的聯(lián)系目前還不清楚。在生物生長發(fā)育過程中CK參與多種細(xì)胞功能及發(fā)育過程的調(diào)節(jié)，具有非常重要的作用。目前，已有對CKL2蛋白激酶在擬南芥

2、中控制植物生物鐘的報道。對于CK1類蛋白功能分析卻不是很多，CKL-3基因?qū)儆贑K1類蛋白，從擬南芥中克隆了一個酪蛋白激酶基因CKL-3。本文對CKL-3的表達(dá)以及生物學(xué)功能進(jìn)行了如下初步研究：
　　 1.在本文中，根據(jù)www.arabidopsis.org網(wǎng)站提供的基因組序列，得到了CKL-3的翻譯起始密碼子上游3219bp的片段。通過www.arabidopsis.org網(wǎng)站，能得到CKL-3的基因組序列，然后利用植物啟動子

3、順式作用元件分析網(wǎng)站plantCARE分析得到大量與光相關(guān)的調(diào)控元件和與脅迫誘導(dǎo)相關(guān)的元件，最后通過基因芯片查出CKL-3在植物不同組織的表達(dá)。CKL-3基因在花中表達(dá)量最高，其次是根，在葉和葉柄中表達(dá)量較弱?；蛐酒治龅慕Y(jié)果后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 2.采用雙引物法篩選出純合子，并用半定量PCR對其進(jìn)行了鑒定。通過提取RNA定量測定它在成年植株中CKL-3基因的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)與基因芯片的預(yù)測相符合。同時還考察了CKL-3基