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1、目的:標(biāo)準(zhǔn)外傷大骨瓣開顱術(shù)是應(yīng)用于顱腦損傷手術(shù)的新術(shù)式,國(guó)內(nèi)外許多臨床研究均表明該術(shù)式能降低惡化型顱內(nèi)高壓患者的致殘率及死亡率。顱腦損傷后繼發(fā)的腦水腫、顱內(nèi)壓增高從本質(zhì)上說(shuō)是一種炎癥現(xiàn)象,腦炎性反應(yīng)在顱腦外傷后的繼發(fā)性腦損傷中發(fā)揮著重要作用, 核因子—kappa B(NF-κB)的活化是引發(fā)腦外傷繼發(fā)性生化級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵步驟,在創(chuàng)傷性腦水腫(TBE)的病理生理發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用改良的Feeney’s自由落體腦損傷打
2、擊裝置制成大鼠重型腦損傷及去大骨瓣減壓模型,多個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)去大骨瓣減壓組和對(duì)照組損傷后行為學(xué)變化、腦組織含水量、NF-κB和S100B 表達(dá)變化進(jìn)行對(duì)比分析,同時(shí)明確NF-κB 與S100B 蛋白的相關(guān)性,以期在分子水平進(jìn)一步說(shuō)明去大骨瓣減壓干預(yù)繼發(fā)性腦損傷的有效性,為創(chuàng)傷性腦損傷的救治尋求有效的干預(yù)和監(jiān)測(cè)途徑。
方法:SPF級(jí)成年SD大鼠90只,體重250~350g,雌雄不限,隨機(jī)分為假手術(shù)組(僅鉆孔,不打擊)6只,實(shí)驗(yàn)組
3、84只,其中又分為非去大骨瓣減壓組(打擊后不去骨瓣,簡(jiǎn)稱NDC組)42 只和去大骨瓣減壓組(打擊后去大骨瓣,簡(jiǎn)稱DC組)42只。NDC組和DC組又分為7個(gè)時(shí)間點(diǎn), 分別為打擊后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、120 h和168 h, 每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只動(dòng)物(如果有動(dòng)物死亡,則選擇備用大鼠重新造模,補(bǔ)充至預(yù)定樣本數(shù))。在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分,然后斷頭取腦,測(cè)定腦組織含水量,免疫組化檢測(cè)NF-κB 與S100B 蛋白表達(dá),并
4、分析其相關(guān)性。
結(jié)果:⑴大鼠腦損傷后死亡率及行為學(xué)改變:NDC組死亡率為25.0%(14/56),DC組死亡率為8.70%(4/46),兩組比較差異有顯著性(P<0.05)。動(dòng)物均于傷后出現(xiàn)不同程度神經(jīng)系統(tǒng)體征,自由落體腦損傷后各時(shí)間點(diǎn)行為學(xué)評(píng)分與假手術(shù)組比較,差異有顯著性(P<0.05或P<0.01)。NDC組評(píng)分恢復(fù)較慢,且DC組評(píng)分優(yōu)于NDC組,168h兩組間比較差異有顯著性(P<0.05)。⑵腦組織含水量:自由落體
5、腦損傷后傷側(cè)腦組織含水量于傷后6h開始升高,傷后24h達(dá)高峰,持續(xù)至48h后開始下降。假手術(shù)組腦組織含水量正常,NDC組最高, DC組處于兩者之間。NDC組和DC組比較,6 h差異有顯著性(P<0.05) ,72 h差異有高度顯著性(P<0.01)。NDC組和DC組120h,168h仍高于假手術(shù)組,但各組間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。⑶大體標(biāo)本及腦組織切片HE染色結(jié)果:肉眼觀察:假手術(shù)組無(wú)異常;打擊傷后傷灶腦組織和蛛網(wǎng)膜下腔均有不同程
6、度出血;傷后72h,腦組織仍腫脹;傷后168h,壞死空洞均被纖維肉芽組織物所填充。HE染色:假手術(shù)組細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,形態(tài)完整,細(xì)胞間質(zhì)無(wú)水腫。打擊傷后鏡下傷灶腦實(shí)質(zhì)血管破裂出血,神經(jīng)細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞腫脹,神經(jīng)元固縮壞死, 炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),微血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,管腔狹窄,間質(zhì)水腫,后期水腫消退,出血吸收,纖維肉芽組織增生。DC組各時(shí)間點(diǎn)病變程度較輕。⑷免疫組化結(jié)果: DC組與NDC組S100B表達(dá)呈現(xiàn)先增加后降低再升高的變化規(guī)律, 成雙峰趨勢(shì)。第
7、一個(gè)峰值出現(xiàn)在傷后6h,第二個(gè)峰值出現(xiàn)在傷后72h,NDC組第二峰較高,DC組第二峰較低;NDC組在120h及168h S100B表達(dá)水平仍較高;NDC組在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量均高于DC組,在48h,72h,120h,168h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較差異有高度顯著性(P <0.01)。腦損傷后6h腦組織NF-κB活性即增高并逐漸增強(qiáng),于傷后24h達(dá)高峰后迅速下降, 48h后逐漸下降;NDC組與DC組變化曲線相似,但NDC組在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均
8、高于DC組,其中在24h、72h及168h差異有高度顯著性(P <0.01),120h差異有顯著性(P <0.05),但6h、12h及48h差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
結(jié)論:①去大骨瓣減壓能夠減輕腦水腫從而保護(hù)腦組織,減輕繼發(fā)性腦損傷,提高重型腦損傷大鼠的行為學(xué)評(píng)分,降低其死亡率;②腦損傷后早期S100B蛋白濃度的升高反映原發(fā)性腦損傷的程度,而后期的升高則反映繼發(fā)性腦損傷的程度;③腦損傷48h后NDC組NF-κB表達(dá)水
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