基于生物芯片的高通量DNA甲基化檢測方法的研究.pdf_第1頁
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1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文基于生物芯片的高通量DNA甲基化檢測方法的研究姓名：武志祥申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：陸祖宏20080407中文摘要物芯片的優(yōu)勢引入到MSMLPA中，探討一種基于生物芯片的MsMLPA。針對被檢測的甲基化DNA，設(shè)計和合成了兩個寡核苷酸部分，其中一個部分含有一個大約20bp左右的密碼區(qū)(Tag區(qū))，可與通用芯片上特定序列的寡核苷酸探針互補雜交。探針的兩個寡核苷酸雜交序列均與目標序列互補，其末端都連有

2、相同的PCR引物。且要求設(shè)計的MSMLPA的探針要有甲基化敏感的限制性內(nèi)切酶BstUI(CG￡G)的識別位點。經(jīng)探針和目標序列雜交后，降低反應(yīng)體系溫度，并向其中加入連接酶和BstUI，若原樣本DNA中含有BstUI識別的非甲基化的位點，則非甲基化探針的兩個寡核苷酸部分不能連接，而甲基化的探針順利連接不被切割，在隨后的PCR反應(yīng)中只有兩個寡核苷酸部分連接后的探針才能被擴增。最后通過芯片分析擴增片段，確定待研究位點的甲基化情況。在這項技術(shù)中

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