健康成人乙型肝炎病毒疫苗接種后無應答者免疫功能研究.pdf

1、目的：通過對乙型肝炎病毒疫苗接種后不同免疫應答人群T細胞亞群、T調(diào)節(jié)細胞、外周血單個核細胞在PHA和HBsAg干預前后Foxp3 mRNA的表達和細胞因子分泌情況的檢測，探討乙型肝炎病毒疫苗接種后免疫應答與T細胞亞群活化、免疫調(diào)節(jié)細胞和細胞因子之間的內(nèi)在聯(lián)系。
　　 方法：對1024名大專生乙型肝炎病毒血清學標志物進行初篩，選取其中無任何血清學標志物的個體進行常規(guī)重組酵母乙型肝炎病毒疫苗接種，全程接種完后45日行HBV血清學檢查

2、。選取其中18例乙型肝炎病毒疫苗接種后HBsAb陽性者作為應答組，22例乙型肝炎病毒疫苗接種HBsAb陰性者作為無應答組，10例未接受乙型肝炎病毒疫苗接種的健康對照者作為對照組。采集不同反應人群全血，用流式細胞術(shù)對其外周血單核細胞的表面標志物：CD69、CD4、CD8、CD25等進行檢測，計算不同T細胞亞群百分比，如CD69+、CD4+、CD8+T細胞百分比及CD4+CD25+Treg細胞數(shù)；實時熒光定量PCR檢測人外周血單個核細胞在P

3、HA和HBsAg刺激前后Foxp3 mRNA的表達；酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測不同反應人群外周血單個核細胞PHA和HBsAg刺激后IL-4、IL-12、IL-18、IFN-γ的分泌情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測2006級大專生1024人，其中血清無任何標志物的有405人，乙型肝炎病毒攜帶率為1.7％。全程接種乙型肝炎病毒疫苗后乙肝血清學顯示：男、女生無、弱應答率之間無顯著性差異；約65％免疫應答個體的乙

4、肝表面抗體滴度屬于高反應組。
　　 2.應答組、無應答組、對照組CD4+CD69+T細胞占CD4+T細胞的百分比分別為1.81±1.33％、0.64±0.48％、和0.56±0.39％，應答組CD4+T細胞中CD69的表達明顯高于對照組(p<0.01)，也明顯高于無應答組。但無應答組與對照組間差異無顯著性意義(p>0.05)。各組CD8+CD69+T細胞占CD8±T細胞的百分比分別為0.43±0.25％、3.05±1.69％、和

5、3.11±2.41％，應答組與對照組和無應答組比較，差異均有非常顯著性意義(p<0.01)。
　　 3.應答組、無應答組、對照組CD3+CD4+T細胞占CD3+T細胞的百分比分別為50.84±6.36％、53.67±6.68％和51.02±9.30％，各組結(jié)果比較，差異沒有顯著性意義(p>0.05)；各組CD3+CD8+T細胞占CD3+T細胞的百分比分別為41.02±4.41％、42.69±7.35％、和42.36±8.34％，

6、統(tǒng)計學分析，組間結(jié)果的差異無顯著性意義(p>0.05)。
　　 4.應答組、無應答組、對照組CD4+CD25+Treg細胞占CD4+T細胞的百分比分別為0.59±0.46％、0.77±0.40％、和1.30±1.44％，統(tǒng)計學分析，組間結(jié)果的差異無顯著性意義(p>0.05)。
　　 5.實時熒光定量PCR檢測應答組、無應答組、對照組外周血單個核細胞Foxp3的表達。PHA和HBsAg刺激前，F(xiàn)oxp3的表達在應答組和無應

7、答組、對照組相比，其差異有顯著性意義(p<0.05)。在PHA和HBsAg刺激后應答組和無應答組相比，p=0.111(P>0.05)，兩者之間沒有顯著性差異；應答組與對照組相比，兩者之間存在顯著性差異(p<0.05)。
　　 6.應答組、無應答組、對照組外周血單個核細胞經(jīng)PHA和HBsAg刺激后應答組與無應答組、應答組與對照組IFN-γ的濃度相比較，其差異均有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；應答組與無應答組，應答組與對照組IL-18

8、、IL-4、IL-12的濃度相比較，其差異均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.20μg每次全程乙型肝炎病毒疫苗接種后無應答率為5.5％，在應答人群中，弱應答率為13％，中應答率為22％，強應答率為65％。
　　 2.乙型肝炎病毒疫苗接種后無應答與Th細胞早期活化不足、Ts細胞活化增加有關(guān)。
　　 3.CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞在一定程度上參與了乙肝疫苗接種應答的負性調(diào)