鴨-魚(yú)混養(yǎng)場(chǎng)養(yǎng)殖環(huán)境抗菌藥物耐藥基因污染及微生物群落特征.pdf

1、在廣東乃至整個(gè)華南地區(qū)，由于水系發(fā)達(dá)，大部分地區(qū)是以鴨-魚(yú)混養(yǎng)模式為主。在養(yǎng)殖過(guò)程中，大量的抗菌藥物被用于促生長(zhǎng)和防治疾病，導(dǎo)致動(dòng)物源性致病菌的耐藥性越來(lái)越嚴(yán)重，這些攜帶有耐藥基因(ARGs)的細(xì)菌經(jīng)排泄物等途徑未經(jīng)處理就進(jìn)入環(huán)境土壤、地表、地下水體中，成為環(huán)境中抗生素耐藥基因的主要來(lái)源，而ARGs作為一種潛在的環(huán)境污染物，受到了人們的廣泛關(guān)注。
　　本論文選擇三個(gè)廣東地區(qū)典型的鴨魚(yú)混養(yǎng)型養(yǎng)殖場(chǎng)，按一年四個(gè)季度連續(xù)四次采集養(yǎng)殖場(chǎng)周

2、邊環(huán)境樣品（土壤、底泥、水），通過(guò)熒光定量的方法連續(xù)監(jiān)測(cè)其耐藥基因豐度；以及通過(guò)16S rDNA高通量測(cè)序的方法監(jiān)測(cè)微生物群落結(jié)構(gòu)的變化情況。監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，在所有樣品中磺胺類(lèi)藥物耐藥基因的豐度較高，其中以sul1基因豐度最高，在土壤、底泥和水中的平均相對(duì)豐度分別達(dá)到8.15×10-1、3.12×10-1和2.31×10-1 copies/16S rDNA copies，高于之前文獻(xiàn)報(bào)告的豐度，環(huán)境中耐藥基因污染嚴(yán)重；結(jié)合各類(lèi)基因豐度大小

3、及其相關(guān)性分析，初步確定了每類(lèi)藥物耐藥基因中具有代表性的指示基因，即磺胺類(lèi)藥物的sul1基因，四環(huán)素類(lèi)藥物的tetM基因，喹諾酮類(lèi)藥物的aac（6’）-Ib基因，酰胺醇類(lèi)藥物的floR基因，β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的blaTEM基因。在不同種類(lèi)環(huán)境樣品中，微生物群落基因豐度呈現(xiàn)土壤樣品>底泥>水的變化趨勢(shì)（p<0.05），而耐藥基因的相對(duì)總濃度（∑ARGs）表現(xiàn)為土壤顯著高于底泥和水。在不同的采樣季節(jié)之間，微生物群落（16S rDNA）的豐度和

4、耐藥基因的相對(duì)豐度（∑ARGs copies/16S rDNAcopies）均出現(xiàn)一定的變化，但無(wú)明顯的變化規(guī)律。
　　對(duì)環(huán)境樣品的微生物結(jié)構(gòu)多樣性分析結(jié)果表明，不同種類(lèi)的環(huán)境樣本在不同季節(jié)其微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性存在一定的差異，其群落優(yōu)勢(shì)細(xì)菌為變形桿菌門(mén)（Proteobacteria）、擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）、放線菌門(mén)（Actinobacteria）、厚壁菌門(mén)（Firmicutes）和綠彎菌門(mén)（Chloroflex