盾殼霉耐堿缺陷型突變體的篩選及相關(guān)基因克隆的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、盾殼霉(Coniothyriumminitans)是引起作物菌核病的核盤菌(Sclerotiniasclerotirium)的重要寄生真菌，在世界范圍內(nèi)廣泛存在，是菌核病的一種重要生防菌。盾殼霉可以在pH2-12的環(huán)境下生長，說明本身具有耐堿的特征。本論文主要目的在于獲得耐堿缺陷型盾殼霉，從中克隆耐堿相關(guān)的基因，為培育耐堿作物積累基因材料。實驗自實驗室前期構(gòu)建好的盾殼霉T-DNA插入突變體庫篩選獲得了4個耐堿缺陷型突變體，并對它們的生物

2、學(xué)特性進(jìn)行了研究。在篩選出的突變體基礎(chǔ)上，利用Tail-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段，同時對所獲得的目的片段進(jìn)行了克隆和鑒定。 實驗共從4300個插入轉(zhuǎn)化子中篩選到ZS-lT2613、ZS-lT2979、ZS-1T3446和ZS-1T20266四個突變體，插入突變的頻率約9.3×10-4。他們在pH為9.0的PDA培養(yǎng)基上不能生長，其中突變體ZS-1T3446在pH為8.0的PDA培養(yǎng)基上就已不能生長。4個突變體與ZS-1菌株相比較，

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