Ezrin、CD44v6、E-cadherin、MMP-2在食管癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)對(duì)食管鱗癌組織中Ezrin蛋白以及CD44v6、E-cadherin、MMp-2蛋白的表達(dá)及Ezrin mRNA的檢測(cè)，探討Ezrin、CD44v6、E-cadherin、MMP-2與食管鱗癌的發(fā)生、分化、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的關(guān)系；Ezrin的表達(dá)與CD44v6、E-cadherin及MMP-2的表達(dá)在食管鱗癌中的相關(guān)性。 方法 1 應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)方法檢測(cè)了4

2、5例食管鱗癌組織，21例不典型增生組織，24例正常的食管粘膜上皮組織中Ezrin、CD44v6、E-cadherin及MMP-2蛋白的表達(dá)。 2 應(yīng)用原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)檢測(cè)了45例食管鱗癌組織，21例不典型增生組織，24例正常的食管粘膜上皮組織中Ezdn mRNA的表達(dá)。 3 應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)27例食管鱗狀細(xì)胞癌，10例不典型增生組織，8例正常的食管粘膜上皮組織中的Ezri

3、n蛋白表達(dá)進(jìn)行定量檢測(cè)。 結(jié)果 1 Ezrin在食管上皮不同病變中的表達(dá)。1．1 免疫組織化學(xué)檢測(cè)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中Ezrin蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：Ezrin蛋白在癌組織中的表達(dá)(73.33％)明顯高于不典型增生組織(61.90％)和正常組織(8.33％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；Ezrin蛋白的表達(dá)與食管鱗癌組織的分化程度及性別和年齡無(wú)相關(guān)性(P>0.0

4、5)；但Ezrin蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)性(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織Ezrin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(85.19％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(55.56％)，且Ezrin蛋白的表達(dá)與癌組織的浸潤(rùn)深度有相關(guān)性(P<0.05)，有纖維膜浸潤(rùn)的癌組織Ezrin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(85.71％)明顯高于無(wú)纖維膜浸潤(rùn)的癌組織(30.00％). 1.2 原位雜交技術(shù)檢測(cè)采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常

5、組織中Ezrin mRNA的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，正常食管粘膜上皮中無(wú)Ezrin mRNA的陽(yáng)性表達(dá)，與免疫組織化學(xué)檢測(cè)的結(jié)果相一致；Ezrin mRNA在癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為71.11％、在不典型增生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為42.86％；Ezrin mRNA的表達(dá)與癌組織的分化程度及性別和年齡無(wú)相關(guān)性(p>0.05)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)性(P<0.05)，且與癌組織的浸潤(rùn)深度有關(guān)性(P<0.05)，與免疫組織化學(xué)檢測(cè)的結(jié)果一致。1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢

6、測(cè)應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)27例癌組織，10例不典型增生組織，8例正常組織中Ezrin蛋白表達(dá)量(FI)檢測(cè)的結(jié)果顯示：Ezrin在癌組織中的表達(dá)(1.5222±0.1055)、在不典型增生組織中的表達(dá)(1.1799±0.1781)明顯高于正常組織(1.008±0.2133)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；且在有、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌組織之間及有無(wú)纖維膜浸潤(rùn)的食管鱗癌組織之間的Ezdn蛋白表達(dá)量(FI)均具有明顯差異(P<0.05)；但

7、Ezdn蛋白的表達(dá)量(FI)在高、中、低分化的食管鱗癌組織之間及性別和年齡之間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，此結(jié)果與免疫組化檢測(cè)的結(jié)果相一致。 2 CD44v6蛋白在食管上皮不同病變中的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中CD44v6蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：CD44v6蛋白在癌組織中的表達(dá)率為66.67％，在不典型增生組織中的表達(dá)率為80.95％，明顯高于正常組織(0％)，三者差別有顯著意義(P

8、<0.05)；且CD44v6蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的CD44v6蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(85.19％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(38.89％)；但CD44v6蛋白的表達(dá)與鱗癌組織的分化程度、浸潤(rùn)深度及性別和年齡之間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。 3 E-cadherin蛋白的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中E-cadherin蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：

9、E-cadherin蛋白在癌組織中的表達(dá)率為28.89％，在不典型增生組織中的表達(dá)率為71.43％，明顯低于正常組織(100％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；E-cadherin蛋白的表達(dá)與食管鱗癌組織的分化程度成正相關(guān)(P<0.05)，分化程度越高，E-cadherin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率越高；且E-cadherin蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的E-cadherin蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(7.41％

10、)明顯低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(61.11％)；但E-cadherin蛋白的表達(dá)與癌組織的浸潤(rùn)深度及性別和年齡之間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。 4 MMP-2蛋白的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中MMP-2蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：MMP-2蛋白在癌組織中的表達(dá)率為40.00％，在不典型增生組織中的表達(dá)率為38.10％，明顯高于正常組織(4.17％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；MMP-2蛋

11、白的表達(dá)與食管鱗癌組織的分化程度成正相關(guān)(P<0.05)，分化程度越高；MMP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率越高；且MMP-2蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的MMP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(55.56％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(16.67％)；且MMP-2蛋白的表達(dá)與癌組織的浸潤(rùn)深度有關(guān)(P<0.05)，有纖維膜浸潤(rùn)的癌組織MMP-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(48.57％)明顯高于無(wú)纖維膜浸潤(rùn)的癌組織(10.00％)

12、。但MMP-2蛋白的表達(dá)與患者的性別和年齡無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。 5 Ezrin與CD44v6、E-cadherin、MMP-2之間的相關(guān)性分析Ezrin蛋白的表達(dá)與CD44v6蛋白的表達(dá)之間成正相關(guān)(X<'2>=4.602，p<0.05)；與E-cadherin蛋白的表達(dá)之間成負(fù)相關(guān)(X<'2>=6.905，P<0.05)；與MMP-2蛋白的表達(dá)之間無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系(X<'2>=3.712，P>0.05)。 7 CD

13、44v6與E-cadhedn、MMP-2的相關(guān)性分析CD44v6蛋白的表達(dá)與E-cadherin蛋白的表達(dá)之間成負(fù)相關(guān)(X<'2>=6.544，P<0.05)；與MMP-2蛋白的表達(dá)之間無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系(X<'2>=0.416，P>0.05)。 8 E-cadherin與MMP-2的相關(guān)性分析E-cadherin蛋白的表達(dá)與MMP-2蛋白的表達(dá)之間成負(fù)相關(guān)(X<'2>=4.615，P<0.05)。 結(jié)論 1 Ezrin蛋白

14、及mRNA水平在食管鱗癌組織及不典型增生組織中的表達(dá)均高于正常組織；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中的陽(yáng)性率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示Ezrin蛋白的高表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移有關(guān)。 2 CD44v6蛋白在食管鱗癌組織及不典型增生組織中的表達(dá)均高于正常組織；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示CD44v6蛋白的高表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移有關(guān)。 3 E-cadherin蛋白在食管鱗癌組織及不典

15、型增生組織中的表達(dá)均低于正常組織，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示E-cadherin蛋白的低表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移有關(guān)；E-cadherin蛋白的表達(dá)與腫瘤的分化程度成正相關(guān)，提示E-cadherin蛋白的表達(dá)對(duì)食管癌惡性程度的評(píng)估有一定的參考價(jià)值。 4 MMP-2蛋白在食管鱗癌組織及不典型增生組織中的表達(dá)均高于正常組織，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示MM

16、P-2蛋白的高表達(dá)可能與食管癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移有關(guān)；MMP-2蛋白的表達(dá)與腫瘤的分化程度成正相關(guān)，提示MMP-2蛋白的表達(dá)對(duì)食管癌惡性程度的評(píng)估有一定的參考價(jià)值。 5 在食管癌中Ezrin蛋白的表達(dá)與CD44v6蛋白表達(dá)之間成正相關(guān)關(guān)系，與E-cadherin蛋白表達(dá)之間成負(fù)相關(guān)，說(shuō)明在食管癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中Ezrin與CD44v6可能有正協(xié)同作用，與E-cadherin可能有負(fù)協(xié)同作用，相互抑制在食管癌轉(zhuǎn)移中的作用。 6