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文檔簡介
1、目的:脂毒性(lipotoxicity)在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過程中具有極其重要的作用。脂蛋白脂肪酶(LPL)是甘油三酯(TG)分解代謝的關鍵酶,以往的研究發(fā)現(xiàn)脂蛋白脂肪酶敲除的雜合子小鼠(LPL+/- mice)脂代謝發(fā)生障礙,未觀察其糖代謝變化。本課題比較脂蛋白脂肪酶(LPL)雜合子小鼠在不同生命時期的胰島素抵抗、胰島β細胞功能以及胰腺和胰島素作用的靶組織中甘油三酯含量的差異,從而了解脂毒性在2型糖尿?。═2DM)發(fā)生、發(fā)展中的作用。
2、 方法:1)第一部分試驗分兩組小鼠:野生型C57小鼠6只[對照組]與LPL+/-小鼠6只(LPL+/-組),對它們行表型鑒定后,分別行CT測量小鼠內臟脂肪和皮下脂肪的含量,內眥靜脈采血分離血清檢測血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和游離脂肪酸(FFA)水平,然后處死小鼠,檢測3組小鼠內臟脂肪和腹部及股部皮下脂肪的質量,制備肝臟、骨骼肌、胰腺病理切片,觀察其形態(tài)學變化,并
3、制備肝臟、四肢骨骼肌、皮下脂肪(取自腹部及股部)、內臟脂肪、胰腺組織勻漿,檢測肝臟、骨骼肌、胰腺的TG水平和肝臟、骨骼肌、內臟脂肪、皮下脂肪、胰腺的TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平。2)野生型C57小鼠(16周齡)6只[對照組]、16周齡LPL+/-小鼠6只(LPL+/-16周齡組)、28周齡LPL+/-小鼠6只(LPL+/-28周齡組),分別行腹腔注射葡萄糖耐量試驗(IPGTT)評價其胰島素抵抗及胰島β細胞分泌功能;3)對照組
4、、LPL+/-16周齡組、LPL+/-28周齡組分別按照前面方法測小鼠內臟脂肪和皮下脂肪的含量、血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平、內臟脂肪和皮下脂肪(取自腹部及股部)的質量,制作肝臟、骨骼肌、胰腺病理切片,檢測肝臟、骨骼肌、胰腺的TG水平和肝臟、骨骼肌、內臟脂肪、皮下脂肪、胰腺的TC、HDL-C、LDL-C、FFA水平。 結果:1)LPL+/-組小鼠的血清TG、TC、LDL-C、FFA水平、內臟脂肪和皮下脂肪的
5、質量和含量均高于對照組,同時LPL+/-組小鼠肝臟、骨骼肌、胰腺組織中TG、TC、LDL-C、FFA含量也高于對照組,但是僅血清TG、FFA水平和內臟脂肪重量的變化具有統(tǒng)計學意義。CT圖像可見LPL+/-組小鼠皮下脂肪和內臟脂肪高于對照組;肝臟、骨骼肌、胰腺病理圖片形態(tài)學變化不明顯。 2)LPL+/-16周齡組小鼠血清及組織內TG、TC、LDL-C、FFA水平較對照組均呈不同水平的增加,血清TG、FFA的增加有統(tǒng)計學差異。LPL+/-2
6、8周齡組小鼠血清、肝臟、骨骼肌、胰腺中TG和血清、肝臟、骨骼肌、皮下脂肪、內臟脂肪、胰腺中TC、LDL-C、FFA水平較LPL+/-16周齡組所增加,但僅肝臟TG水平與LPL+/-16周齡組之間有統(tǒng)計學差異。LPL+/-28周齡組的血清TG、肝臟TG、內臟脂肪TC及骨骼肌FFA、皮下脂肪FFA、胰腺FFA水平較對照組增高,有統(tǒng)計學差異。三組間HDL-C的變化無統(tǒng)計學差異。LPL+/-16周齡組的內臟脂肪質量高于對照組,具有統(tǒng)計學差異;L
7、PL+/-28周齡組小鼠內臟脂肪和皮下脂肪的質量和含量均高于對照組和LPL+/-16周齡組,均具有統(tǒng)計學意義。肝臟、骨骼肌、胰腺形態(tài)差異不顯著。3)LPL+/-16周齡組小鼠空腹血糖(FPG)、血糖曲線下面積、空腹胰島素(FINS)、HOMA-β、HOMA-IR均高于對照,但差異無統(tǒng)計學意義;LPL+/-28周齡組小鼠FPG、血糖曲線下面積、FINS、HOMA-β、HOMA-IR較LPL+/-16周齡組高,但僅FINS、HOMA-IR的
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