促攝食物質(zhì)對吉富羅非魚攝食、生長的影響及機制研究.pdf

1、羅非魚生長速度快、食性廣，是世界上一種重要的養(yǎng)殖魚類。2014年，全球羅非魚產(chǎn)量達到545萬噸，其中中國羅非魚產(chǎn)量為169.8萬噸。隨著羅非魚養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，對飼料蛋白源的需求量不斷增加。目前，高植物蛋白飼料在羅非魚養(yǎng)殖中的應用越來越廣泛。但高植物蛋白飼料適口性普遍較差，影響羅非魚的生長和生理功能，如何通過添加適宜的促攝食物質(zhì)改善羅非魚的攝食和生長性能，并探討其作用機制，在羅非魚養(yǎng)殖中具有重要的理論意義和實際應用價值。為此，本論文研究

2、了二甲基-β-丙酸噻亭（Dimethyl-β-propiothetin，DMPT）、二甲基-β-乙酸噻亭（Dimethylthetin，DMT）、甜菜堿（Betaine，Bet）、?；撬幔═aurine，Tau）、色氨酸（Tryptophan，Trp）、混合核苷酸（Mixednucleotides，Mix-NT）和魷魚膏（Squid liver paste，SQLP）等7種促攝食物質(zhì)在吉富羅非魚（GIFTOreochromis nilo

3、ticus）高植物蛋白飼料中的適宜添加量和對吉富羅非魚攝食、生長的影響，并探討了的作用機制。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下。
　　1.高植物蛋白飼料中7種促攝食物質(zhì)的適宜添加量研究
　　選取560尾體重為8.59±0.04 g的吉富羅非魚，隨機分為7組，每組4個重復并且獨立循環(huán)。以4％魚粉、18%豆粕、6%雙低菜粕、20%巴基斯坦菜粕和19%棉粕為蛋白源，2%大豆油和3%磷脂油為脂肪源，26%面粉為糖源配制基礎(chǔ)飼料，粗蛋白水平為35

4、4.2g kg-1，能量為17.95 MJkg-1。7種促攝食物質(zhì)分別設(shè)置5個添加水平：DMPT0，0.2，0.4，0.6，0.8 g kg-1；DMT，0，0.2，0.4，0.6，0.8 g kg-1；Bet，0，3，6，9，12 g kg-1；Trp，0，0.6，1.2，1.8，2.4 g kg-1；Tau，0，4，8，12，16 g kg-1；Mix-NT，0，0.4，0.8，1.2，1.6 g kg-1；SQLP，0，10，20

5、，30，40g kg-1。在基礎(chǔ)飼料中分別添加每一種促攝食物質(zhì)的每一個添加水平，并用5種惰性元素（Y2O3、La2O3、Sm2O3、Nd2O3、Yb2O3）分別進行標記。將每一種促攝食物質(zhì)的五個添加水平飼料等量混合投喂每一組羅非魚，收集糞便，分析糞便中惰性元素比例，計算羅非魚高植物蛋白飼料中每一種促攝食物質(zhì)的適宜添加水平。結(jié)果顯示，羅非魚對7種促攝食物質(zhì)偏好的適宜添加水平分別為：DMPT，0.4 g kg-1；DMT，0.6 g kg-

6、1；Bet，6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1和SQLP，30 g kg-1。
　　2.7種促攝食物質(zhì)對羅非魚高植物蛋白飼料營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響
　　選取360尾體重為62.95±3.54 g的健康吉富羅非魚隨機分為8組，每組3個重復，投喂基礎(chǔ)飼料（配方同1）和分別含有7種促攝食物質(zhì)的試驗飼料，其添加水平分別為DMPT，0.4 g kg-1；DM

7、T，0.6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1；Bet，6 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1和SQLP，30 g kg-1。飼料以300 mg kg-1Y2O3作為外源性指示劑。每天投喂兩次，表觀飽食投喂。采用撈網(wǎng)法收集糞便，Y2O3采用等離子發(fā)光色譜法檢測。結(jié)果顯示，羅非魚對8種飼料的脂肪表觀消化率沒有顯著差異。羅非魚對SQLP飼料干物質(zhì)、粗蛋白和能量的表觀消化率顯著低于其它各組飼料

8、。DMPT飼料干物質(zhì)表觀消化率顯著高于基礎(chǔ)飼料。Bet飼料磷的表觀消化率顯著高于基礎(chǔ)飼料組。羅非魚對SQLP飼料中天冬氨酸、谷氨酸的表觀消化率顯著低于其它各試驗飼料，而羅非魚對DMPT飼料中天冬氨酸的表觀消化率顯著高于基礎(chǔ)、Mix-NT和Tau飼料。
　　3.7種促攝食物質(zhì)在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚攝食、生長性能、血清生化指標、消化酶活和腸道組織結(jié)構(gòu)的影響
　　在基礎(chǔ)配方（同1）中分別添加7種促攝食物質(zhì)配制7種試驗飼料，

9、其添加水平分別為：DMPT，0.4g kg-1；DMT，0.6 g kg-1；Bet，6 g kg-1；Tau，16 g kg-1；Trp，1.8 g kg-1；Mix-NT，0.4 g kg-1；和SQLP，30 g kg-1。選取600尾體重為3.34±0.01g的吉富羅非魚，隨機分為8組，每組3個重復，分別投喂基礎(chǔ)飼料和7種試驗飼料。飼養(yǎng)期為8周。結(jié)果顯示，SQLP顯著提高羅非魚的攝食（FI）、末體重（FBW）和特定生長率（SGR

10、）。Mix-NT顯著提高羅非魚的FBW、SGR和飼料效率（FE）。Bet顯著提高羅非魚的蛋白質(zhì)效率（PER）和FE。7種促攝食物質(zhì)對全魚體組成沒有顯著影響。Trp、Bet和SQLP顯著提高臟體比（VSI）。SQLP組羅非魚血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)顯著高于其它各組。Mix-NT組腸道蛋白酶活性顯著高于其它各組，Bet組腸道和肝胰臟蛋白酶活性顯著高于基礎(chǔ)飼料組。DMPT、Mix-NT和Bet組腸道淀粉酶活性顯著高于其它各組，SQ

11、LP組腸道淀粉酶活性顯著高基礎(chǔ)飼料組。Bet和Mix-NT組腸道褶皺長度顯著高于基礎(chǔ)飼料、DMT和Trp組。
　　4.7種促攝食物質(zhì)在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚肌肉品質(zhì)的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，采集肌肉進行肌肉品質(zhì)相關(guān)分析。結(jié)果顯示，SQLP組肌肉粗蛋白、膠原蛋白和15種氨基酸含量、蒸煮損失和Bet組肌肉肌苷酸（IMP）和11種氨基酸含量均顯著高于基礎(chǔ)飼料組。Bet組肌肉總超氧化物歧化酶（T-

12、SOD）活性顯著高于其它各組；而其肌肉丙二醛（MDA）含量和pH24h卻顯著低于基礎(chǔ)飼料組。與基礎(chǔ)飼料組相比，Mix-NT組羅非魚肌肉pH24h顯著降低，而過氧化氫酶（CAT）活性顯著升高；DMT組肌肉MDA含量顯著減少，而其肌肉蘇氨酸和絲氨酸含量顯著增加；DMPT組T-SOD活性、肌肉蛋氨酸含量和Tau組肌肉丙氨酸含量分別顯著升高；Trp組和Mix-NT組肌肉15種氨基酸含量與基礎(chǔ)飼料組相比無顯著差異。
　　5.7種促攝食物質(zhì)在

13、高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚食欲相關(guān)基因表達的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，采集腦、胃和肝胰臟，進行食欲相關(guān)基因表達量的檢測。結(jié)果顯示，Trp組腦神經(jīng)肽Y（NPY）、腦刺鼠相關(guān)蛋白（AgRP）、腦和胃膽囊收縮素（CCK）基因表達水平最高，其中，腦NPY基因表達水平與基礎(chǔ)飼料組相比有顯著差異；DMT組胃饑餓素（Ghrelin）基因表達水平最高，且與基礎(chǔ)飼料組相比有顯著差異；Tau組肝胰臟瘦素（Leptin）基

14、因表達水平最高，顯著高于其它各組。DMPT、Mix-NT和SQLP組食欲相關(guān)基因表達水平與對照組相比沒有顯著差異。
　　6.7種促攝食物質(zhì)在高植物蛋白飼料中對吉富羅非魚血清GH、IGF-I含量及生長軸相關(guān)基因表達量的影響
　　試驗飼料、分組及投喂同3.。飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，采集血清檢測GH、IGF-I含量，采集腦和肝胰臟檢測生長軸相關(guān)基因表達量。結(jié)果顯示，SQLP能顯著提高血清IGF-I含量和腦GH mRNA表達。Mix-NT能

15、顯著提高血清IGF-I含量和腦GH、肝胰臟GHR、IGF-I mRNA表達量。Bet能顯著提高腦GH mRNA表達量。DMPT、DMT、Trp和Tau對相關(guān)指標作用不顯著。
　　綜上所述：
　?。?）SQLP對羅非魚能顯著提高吉富羅非魚攝食、生長性能和肌肉粗蛋白含量，與食欲相關(guān)基因沒有明確的相關(guān)性。SQLP一方面能提高攝食促進羅非魚的生長，同時促進生長軸相關(guān)因子分泌表達促進生長。
　　（2）Mix-NT對吉富羅非魚長期

16、攝食提高作用均不顯著，與食欲相關(guān)因子沒有明確的相關(guān)性。Mix-NT能顯著提高吉富羅非魚特定生長率和飼料效率，這可能與消化酶的活性提高以及腸道組織結(jié)構(gòu)改善有關(guān)；生長軸相關(guān)因子的分泌表達增加也起到一定作用。
　?。?）Bet對吉富羅非魚長期攝食沒有顯著的促進作用，但能顯著提高羅非魚的蛋白質(zhì)效率和飼料效率以及肌肉蛋白含量，其機理可能在于一方面提高消化酶活性，改善腸道組織結(jié)構(gòu)，提高磷的消化率，另一方面提高GH mRNA的表達。