足細胞相關(guān)分子在IgA腎病大鼠中的變化及意義.pdf

1、IgA腎病（IgAN）是世界范圍內(nèi)最常見的原發(fā)性腎小球疾病之一，呈慢性進展過程，目前是我國終末期腎?。‥SRD）維持血液透析的首位原發(fā)病。蛋白尿是引起IgAN患者腎衰竭的重要危險因素，因此積極控制蛋白尿?qū)τ谘泳廔gAN的進展十分重要。既往在某些人類遺傳性或獲得性腎臟疾病及腎病動物模型的研究發(fā)現(xiàn)足細胞相關(guān)分子在腎臟病蛋白尿的發(fā)生中起關(guān)鍵作用。目前IgAN蛋白尿的發(fā)生機制尚不明確，這些足細胞相關(guān)分子是否也參與了IgAN蛋白尿的發(fā)生，目前報道

2、很少，值得進一步研究。 目的： 通過建立IgAN大鼠模型，觀察腎小球足細胞相關(guān)分子nephrin、podocin、CD2AP、desmin表達及分布的動態(tài)變化，研究其與IgAN蛋白尿的關(guān)系，探討IgAN蛋白尿的發(fā)生機制。 方法： 選取6周齡雄性SD大鼠96只，兩次尿蛋白定性和尿紅細胞計數(shù)陰性，隨機分為兩組，即對照組、模型組各48只。模型組采用改良牛血清白蛋白（BSA）+四氯化碳（CCl4）+脂多糖（LPS

3、）的方法建立IgAN大鼠模型，對照組及模型組在實驗第2、4、6、8、10、12周末各處死大鼠8只。 在實驗第2、4、6、8、10、12周末，觀察兩組大鼠下列各項指標情況： （1）肉眼血尿、尿紅細胞計數(shù)、24小時尿蛋白定量； （2）血生化指標：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）、總膽紅素（TBIL）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、肌酸

4、激酶同工酶（CK—MB）； （3）光鏡和電鏡下觀察腎組織形態(tài)學變化； （4）應用直接免疫熒光法觀察腎小球IgA沉積強度； （5）應用間接免疫熒光法檢測腎小球nephrin、podocin、desmin蛋白的表達及分布； （6）采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測腎皮質(zhì)nephrin、podocin、CD2AP和desmin mRNA的表達。 結(jié)論： 1、改良口服BSA+皮下注射CCl4+尾靜脈注

5、射LPS的方法能成功制備IgAN大鼠模型。 2、IgAN大鼠模型腎組織nephrin、podocin、CD2AP、desmin的表達存在動態(tài)變化，即nephrin蛋白及mRNA、podocin蛋白及mRNA、CD2AP mRNA及desmin mRNA的表達先上調(diào)后下調(diào)，desmin蛋白的表達持續(xù)上調(diào)。 3、IgAN大鼠模型腎小球nephrin、podocin的分布出現(xiàn)異常，即由沿毛細血管袢連續(xù)線性分布漸變?yōu)椴贿B續(xù)顆粒狀