足細(xì)胞相關(guān)分子在IgA腎病大鼠中的變化及意義.pdf

1、IgA腎?。↖gAN）是世界范圍內(nèi)最常見的原發(fā)性腎小球疾病之一，呈慢性進(jìn)展過程，目前是我國(guó)終末期腎?。‥SRD）維持血液透析的首位原發(fā)病。蛋白尿是引起IgAN患者腎衰竭的重要危險(xiǎn)因素，因此積極控制蛋白尿?qū)τ谘泳廔gAN的進(jìn)展十分重要。既往在某些人類遺傳性或獲得性腎臟疾病及腎病動(dòng)物模型的研究發(fā)現(xiàn)足細(xì)胞相關(guān)分子在腎臟病蛋白尿的發(fā)生中起關(guān)鍵作用。目前IgAN蛋白尿的發(fā)生機(jī)制尚不明確，這些足細(xì)胞相關(guān)分子是否也參與了IgAN蛋白尿的發(fā)生，目前報(bào)道

2、很少，值得進(jìn)一步研究。 目的： 通過建立IgAN大鼠模型，觀察腎小球足細(xì)胞相關(guān)分子nephrin、podocin、CD2AP、desmin表達(dá)及分布的動(dòng)態(tài)變化，研究其與IgAN蛋白尿的關(guān)系，探討IgAN蛋白尿的發(fā)生機(jī)制。 方法： 選取6周齡雄性SD大鼠96只，兩次尿蛋白定性和尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)陰性，隨機(jī)分為兩組，即對(duì)照組、模型組各48只。模型組采用改良牛血清白蛋白（BSA）+四氯化碳（CCl4）+脂多糖（LPS

3、）的方法建立IgAN大鼠模型，對(duì)照組及模型組在實(shí)驗(yàn)第2、4、6、8、10、12周末各處死大鼠8只。 在實(shí)驗(yàn)第2、4、6、8、10、12周末，觀察兩組大鼠下列各項(xiàng)指標(biāo)情況： （1）肉眼血尿、尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、24小時(shí)尿蛋白定量； （2）血生化指標(biāo)：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）、總膽紅素（TBIL）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、肌酸

4、激酶同工酶（CK—MB）； （3）光鏡和電鏡下觀察腎組織形態(tài)學(xué)變化； （4）應(yīng)用直接免疫熒光法觀察腎小球IgA沉積強(qiáng)度； （5）應(yīng)用間接免疫熒光法檢測(cè)腎小球nephrin、podocin、desmin蛋白的表達(dá)及分布； （6）采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)腎皮質(zhì)nephrin、podocin、CD2AP和desmin mRNA的表達(dá)。 結(jié)論： 1、改良口服BSA+皮下注射CCl4+尾靜脈注

5、射LPS的方法能成功制備IgAN大鼠模型。 2、IgAN大鼠模型腎組織nephrin、podocin、CD2AP、desmin的表達(dá)存在動(dòng)態(tài)變化，即nephrin蛋白及mRNA、podocin蛋白及mRNA、CD2AP mRNA及desmin mRNA的表達(dá)先上調(diào)后下調(diào)，desmin蛋白的表達(dá)持續(xù)上調(diào)。 3、IgAN大鼠模型腎小球nephrin、podocin的分布出現(xiàn)異常，即由沿毛細(xì)血管袢連續(xù)線性分布漸變?yōu)椴贿B續(xù)顆粒狀