Notch信號(hào)通路在IgA腎病腎間質(zhì)纖維化中的變化及意義.pdf

1、目的:
　　 IgA腎病(IgAnephropathy,IgAN)，是世界上最常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病之一，臨床表現(xiàn)多種多樣。在我國(guó)，IgAN的發(fā)病率占原發(fā)性腎小球腎炎的25％～50％，其中1/3的患者的腎功能進(jìn)行性惡化，并最終發(fā)展為終末期腎病(end-stagerenaldisease，ESRD)。但其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。近年的研究發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化(epithelial-mesenchymaltransition，E

2、MT)在IgA腎病腎間質(zhì)纖維化發(fā)生、發(fā)展中起著不容忽視的作用。TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)腎間質(zhì)纖維化及EMT的重要作用(已)得到公認(rèn)，TGF-β1可以激活smads信號(hào)途徑，也可以激活smads信號(hào)途徑以外的信號(hào)傳導(dǎo)。Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是TGF-β1延遲激活的非smads信號(hào)途徑，直接在鄰近細(xì)胞之間精確地進(jìn)行信號(hào)傳遞，調(diào)節(jié)著細(xì)胞的增生，分化，生長(zhǎng)和凋亡等，并參與了許多腎臟疾病的發(fā)生發(fā)展。本課題旨在研究Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在IgAN

3、的腎間質(zhì)纖維化中的變化和意義。
　　 方法:
　　 實(shí)驗(yàn)組來(lái)自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科于2011年6月到2012年8月期間經(jīng)臨床及腎活檢病理診斷確診為IgA腎病的患者38例（其中男性22例，女性16例，年齡14～60歲，平均年齡49±8.71歲），并除外紫癜性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、乙肝相關(guān)性腎炎等繼發(fā)性IgAN，除外合并心衰、感染、肥胖、妊娠、肝臟疾病、藥物等導(dǎo)致的腎損傷及急性間質(zhì)性腎炎等患者。病理診斷采用

4、2009年國(guó)際腎臟病理協(xié)會(huì)組織制定的IgAN牛津病理分型。本實(shí)驗(yàn)分組:按牛津病理分型，有無(wú)腎小球硬化、腎小管萎縮或間質(zhì)纖維化分為T00％～25％為輕度(G1，n=15，男∶女=8∶7，平均年齡37.93±15.873歲);T126％～50％為中度(G2，n=15，男∶女=9∶6，平均年齡40.56±11.627歲);T2＞50％為重度(G3，n=8，男∶女=5∶3，平均年齡35.58±12.059歲)。對(duì)照組（C組，n=5例，男∶女=3

5、∶2，平均年齡50±10.07歲）河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科5例腎腫瘤做腎切除術(shù)但遠(yuǎn)離腫瘤部位的腎組織，均經(jīng)光鏡證實(shí)為正常腎組織。免疫組織化學(xué)方法定位檢測(cè)腎組織中Notch1、Jagged1的表達(dá)并進(jìn)行病理圖像分析，計(jì)算陽(yáng)性目標(biāo)表達(dá)的平均光密度。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IgAN患者外周血中的Notch1、Jagged1。同時(shí)測(cè)定血生化的臨床指標(biāo):血清白蛋白(ALB)、血膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋

6、白(LDL-C)、24小時(shí)尿蛋白定量(Upro)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA）及尿滲透壓，并評(píng)估eGFR。所得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，檢驗(yàn)為正態(tài)方差齊，用方差分析(ANOVA)，非正態(tài)或方差不齊用非參數(shù)檢驗(yàn)，多組間比較用Kruskal-WallisH檢驗(yàn)，相關(guān)性用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)，P＜0.05水準(zhǔn)表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　

7、 1、性別與年齡:G1、G2、G3組與C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2、尿蛋白定量:隨著病情的進(jìn)展，24小時(shí)尿蛋白定量增加，G1、G2、G3組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）;
　　 3、血脂和血漿白蛋白水平:TG、TC、HDL-C、LDL-C和ALB在四組間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4、腎功能測(cè)定:IgAN各組間G1、G2、G3組與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　

8、　 5、Notch1與Jagged1免疫組化結(jié)果顯示:①在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，Notch1和Jagged1在腎小管以近段腎小管為主表達(dá)，且實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組表達(dá)數(shù)量均增多;②在IgA腎病各組，隨著病情的進(jìn)展，Notch1和Jagged1在腎小管上皮細(xì)胞的表達(dá)越來(lái)越多，至分級(jí)為T2時(shí)最多;③在對(duì)照組，Notch1和Jagged1極少量表達(dá)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理后得出:①在腎小管，Notch1和Jagged1IgA腎病組較正常對(duì)照組均增加，差異有統(tǒng)計(jì)

9、學(xué)意義(P＜0.05);②Notch1和Jagged1在G3組表達(dá)最多，在G2組次之，各組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 6、酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)Notch1、Jagged1的結(jié)果顯示:Notch1和Jagged1隨著腎纖維化程度的加重表達(dá)也隨之增加，Notch1各組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），Jagged1的G2和G3組間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 7、

10、相關(guān)性分析:發(fā)現(xiàn)Notch1表達(dá)分別與Jagged1表達(dá)、尿酸、Scr、24尿蛋白定量正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.869、r=0.440、r=0.633、r=0.598，P＜0.01)，與尿滲透壓、eGFR成負(fù)相關(guān)（相關(guān)系數(shù)為r=-0.612，r=-0.635，P＜0.01)，與ALB、BMI無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。此外，Jagged1表達(dá)分別與尿酸、Scr、24尿蛋白定量正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.413r=0.836r=0