一株FPV-GZ01貓細(xì)小病毒的分離鑒定與遺傳進(jìn)化分析及對(duì)貓的致病性研究.pdf

1、為了解廣州地區(qū)的貓細(xì)小病毒的生物學(xué)特性，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)收集的11份糞便樣品進(jìn)行 PCR鑒定以及對(duì)鑒定結(jié)果為陽(yáng)性的糞便樣品進(jìn)行血凝實(shí)驗(yàn)、理化特性實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞分離鑒定實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，從11份糞便樣品中通過(guò)PCR方法鑒定出2份陽(yáng)性的糞便樣品。2份陽(yáng)性的糞便樣品均能凝集1％的豬紅細(xì)胞，且血凝效價(jià)為1:128。使用 F81細(xì)胞對(duì)2份陽(yáng)性糞便樣品進(jìn)行病毒分離，結(jié)果顯示編號(hào) FPV-GZ01的糞便樣品在 F81細(xì)胞上出現(xiàn)細(xì)胞病變，成功分離出 FPV，編

2、號(hào) FPV-GZ02糞便樣品未分離到FPV，這可能與糞便中的病毒含量有關(guān)。病毒的理化特性結(jié)果顯示，F(xiàn)PV能夠耐酸、堿、加熱以及脂溶劑，但對(duì)具有DNA細(xì)胞毒性的物質(zhì)不耐受。
　　為了解廣州地區(qū)貓細(xì)小病毒的自然重組、跨宿主傳播以及流行變異情況，通過(guò)采集疑似感染貓細(xì)小病毒的糞便病料進(jìn)行 PCR鑒定，對(duì)陽(yáng)性糞便樣品提取基因組DNA，用PCR方法擴(kuò)增獲得病毒全基因組序列，并與GenBank中相關(guān)的參考毒株序列進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析，同時(shí)對(duì) VP2

3、基因與 NS1基因主要氨基酸位點(diǎn)進(jìn)行差異分析。結(jié)果表明，成功獲得2個(gè)貓細(xì)小病毒的全基因組序列。核苷酸系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示，廣州地區(qū)貓細(xì)小病毒 FPV-GZ01、FPV-GZ02與我國(guó)其它分離毒株 FPV-XJ01、FPV-HRB屬同一分支，且提示 FPV-GZ01、FPV-GZ02由 FPV-XJ01進(jìn)化而來(lái)；NS1基因的核苷酸系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示，F(xiàn)PV存在與 CPV-447重組的可能；主要氨基酸位點(diǎn)分析顯示，F(xiàn)PV在 VP2基因中主要氨基酸位

4、點(diǎn)的遺傳變異比 CPV保守；在 NS1基因上發(fā)現(xiàn)FPV-GZ01、FPV-GZ02分別存在不同程度的氨基酸位點(diǎn)突變。
　　為了解廣州地區(qū)貓細(xì)小病毒的感染性和致病性，本實(shí)驗(yàn)采用口服病毒的方法，使用 FPV-GZ01細(xì)胞分離毒株對(duì)幼貓進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，感染 FPV的幼貓出現(xiàn)了體溫升高發(fā)熱的現(xiàn)象，其中1只實(shí)驗(yàn)組幼貓出現(xiàn)典型的雙相熱特征；體重變化方面，實(shí)驗(yàn)組幼貓均出現(xiàn)體重不斷下降的情況，表明感染 FPV能夠?qū)е掠棕埵秤陆担裎?/p>