肝細(xì)胞癌中刀豆蛋白凝集素A結(jié)合型組織蛋白酶D前體的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、CharacterizationandclinicalsignificanceofConcanaValinA—bindingpro—cathepsinDinhepatocellularcarcinomaThesisSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniVersi夠inParrtialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineB

2、yMaJinSupeⅣisor：DrQiYi—JunCo—supervisor：DrRenHong—ZhengMay2014摘要背景肝細(xì)胞癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界上常見(jiàn)的六大惡性腫瘤之一，其死亡率居全球惡性腫瘤死亡率的第三位。目前，HCC患者預(yù)后極差，5年生存率低于5％，而導(dǎo)致HcC預(yù)后極差的主要原因之一是大多數(shù)HCC患者確診時(shí)己處于中晚期，錯(cuò)過(guò)了最佳治療時(shí)機(jī)。因此，對(duì)HCC高危人群(慢性肝硬化

3、患者、乙肝及丙肝病毒攜帶者)進(jìn)行隨訪、定期篩查，是發(fā)現(xiàn)早期HCC患者和降低HCC發(fā)病率及死亡率的有效手段之一。AFP診斷HCC的敏感性(4065％)和特異性(7696％)均不理想，尤其是HCC的早期診斷。因此，亟需尋找HCC早期診斷的新型生物標(biāo)志物。蛋白質(zhì)糖基化是蛋白質(zhì)最常見(jiàn)和最重要的翻譯后修飾，糖蛋白的寡糖側(cè)鏈參與如蛋白質(zhì)正確折疊、細(xì)胞間或細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞粘附和遷移、胚胎發(fā)育及炎癥等生理或病理過(guò)程。尤其重要的是，蛋白質(zhì)的異常糖基化

4、與惡性腫瘤等多種疾病的病理過(guò)程密切相關(guān)。大量研究表明：許多腫瘤形成和進(jìn)展過(guò)程中均涉及蛋白質(zhì)的異常糖基化，異常糖基化能增加腫瘤細(xì)胞的粘附和遷移能力，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。目前，臨床上常用的腫瘤診斷生物標(biāo)志物和藥物治療靶點(diǎn)多為糖蛋白，如AFP／AFPL3(HCC)、CEA(胰腺癌)、PSA(前列腺癌)、CAl53與CEA(乳腺癌)、CAl25(卵巢癌)等。本課題組前期發(fā)現(xiàn)：組織蛋白酶D前體(Pro—calllepsinD，

5、pCD)在HCC組織中顯著高表達(dá)，因此，本研究分析與刀豆蛋白凝集素A(ConcaIlavaliIlA，ConA)特異結(jié)合的pCD(CorApCD)在HCC組織、HCC細(xì)胞系及HCC患者血清中的表達(dá)規(guī)律，并分析其異常表達(dá)的臨床意義。目的本研究采用ConA親和層析法分別分離純化組織(HCC及癌旁非癌肝組織)、細(xì)胞(肝永生化細(xì)胞系及肝癌細(xì)胞系)和血清(HCC、肝硬化、慢性肝炎及健康對(duì)照)來(lái)源的N一連接糖蛋白，Westemblot檢測(cè)CoIAp