在bufalin誘導(dǎo)白血病K562細(xì)胞凋亡和分化中WT1表達(dá)被下調(diào).pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文在bufalin誘導(dǎo)白血病K562細(xì)胞凋亡和分化中WT1表達(dá)被下調(diào)姓名：曲秀娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：劉云鵬2001.4.1抗體購(gòu)于PharmingenUSA堿性磷酸酶標(biāo)記的馬抗鼠I夠抗體購(gòu)于北京中山生物制劑公司PCR擴(kuò)增儀(PE2400USA)GDS8000成像分析儀(BDUK)流式細(xì)胞儀(BectonDickinsonFACScanUSA)。了實(shí)驗(yàn)方法一、細(xì)胞培養(yǎng):慢性粒細(xì)胞白血病急性變細(xì)胞系

2、K562細(xì)胞，生長(zhǎng)于含有56`C30分滅活后的10%的胎牛血清和12Uml慶大霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，于37C5%COZ、飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)傳代培養(yǎng)。所有實(shí)驗(yàn)均采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。二、細(xì)胞增殖:細(xì)胞增殖活力測(cè)定采用臺(tái)盼藍(lán)拒染法。三、細(xì)胞誘導(dǎo)分化的檢測(cè):采用瑞氏一姬姆薩染色的形態(tài)學(xué)分析和NBT還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的分化。四、細(xì)胞凋亡的檢測(cè):采用形態(tài)學(xué)分析檢測(cè)細(xì)胞凋亡。五、細(xì)胞周期解析:應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期解析。六、WTI表達(dá)的檢