TRAIL誘導(dǎo)白血病細(xì)胞株K562、U937凋亡及其作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文TRAIL誘導(dǎo)白血病細(xì)胞株K562、U937凋亡及其作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：溫麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：張學(xué)軍20060301中文摘要l_3TLn怔L染色法。將濃度為125p∥ml、5肚g／m1、20u∥ml的TRAIL作用2h的u937細(xì)胞及溶劑對(duì)照組u937細(xì)胞涂片，采用細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒，按說(shuō)明書(shū)操作，觀察凋亡形態(tài)，并計(jì)算凋亡指數(shù)(TuNEL陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比)。2采用MTT法分別檢測(cè)不同

2、濃度TRAIL、DNR單獨(dú)及聯(lián)合作用時(shí)對(duì)K562、u937細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率。3用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(enzyme1inkedimmunosorbentassay，ELIsA)檢測(cè)TRAIL對(duì)u937細(xì)胞株凋亡誘導(dǎo)的量一效、時(shí)一效關(guān)系。4采用半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(semiquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction，R1∑PCR)方法檢測(cè)K562、U937及MRC5細(xì)

3、胞以DNR處理24小時(shí)后TRAIL死亡受體和誘騙受體表達(dá)變化，分析TRAIL治療效果和與化療協(xié)同作用的機(jī)理。結(jié)果：1倒置顯微鏡下觀察到TRAIL作用下的u937細(xì)胞出現(xiàn)體積變小、變形、細(xì)胞膜發(fā)泡等凋亡現(xiàn)象。收集一定濃度TRAIL作用2小時(shí)的u937白血病細(xì)胞株，用A0／EB染色法熒光顯微鏡下觀察到典型的早期及晚期凋亡的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；細(xì)胞涂片的TU№L染色可以在顯微鏡下見(jiàn)到大量棕黃色的凋亡細(xì)胞，計(jì)算凋亡指數(shù)為183673～631579％