應(yīng)用單細(xì)胞分離技術(shù)檢測(cè)孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞.pdf

1、通過檢測(cè)孕婦外周血中的胎兒有核細(xì)胞的攜帶的遺傳信息進(jìn)行產(chǎn)前診斷是一項(xiàng)新興的有著廣闊前景的診斷技術(shù).但它目前還面臨許多問題,首先是分離純化方法的優(yōu)化.尋找一種保證高純度的分離方法是研究者所夢(mèng)寐以求的.該研究動(dòng)手單細(xì)胞分離法對(duì)51例孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),再用巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增SRY基因證實(shí)其胎源性,對(duì)該分離方法的可行性與科學(xué)性進(jìn)行了研究探討.1、顯微操作分離單個(gè)胎兒有核紅細(xì)胞:用密度梯度離心法初步分離出51例中孕期婦女外周血

2、中的有核細(xì)胞層,制成細(xì)胞甩片后,作瑞氏染色,在光鏡下觀察胎兒有核紅細(xì)胞的形態(tài),并統(tǒng)計(jì)胎兒有核紅細(xì)胞個(gè)數(shù)與有核細(xì)胞個(gè)數(shù)的比值.在倒置顯微鏡下吸限單個(gè)胎兒有核紅細(xì)胞.結(jié)果提示(1)母血中存在胎兒有核紅細(xì)胞,但數(shù)量極少,約占0.0038﹪~0.0511﹪(2)孕婦外周血中的胎兒有核紅細(xì)胞的分離純化較難,用單細(xì)胞分離法可解決這一難題.2、用巢式聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)胎兒Y特異性序列(SRY基因)來證實(shí)所取單個(gè)細(xì)胞的胎源性:單個(gè)細(xì)胞用巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增