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文檔簡介
1、血液內(nèi)存在一些數(shù)量稀少卻具有重要臨床價值的稀有細胞,如循環(huán)腫瘤細胞、循環(huán)內(nèi)皮細胞、良性的循環(huán)上皮細胞、以及孕婦外周血中胎兒有核紅細胞等,其中循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)因為可能提示了體內(nèi)腫瘤的存在與復(fù)發(fā)風(fēng)險,以及成為體內(nèi)除原位病灶以外的腫瘤細胞的來源而成為了癌癥研究的熱點。目前絕大部分研究主要針對外周血中全體CTC進行計數(shù)以及基因突變分析,而忽略了CTC的異質(zhì)性,尤其是CTC在遺傳學(xué)上的異質(zhì)性
2、與功能上異質(zhì)性的相互關(guān)系,因此必須發(fā)展針對單個CTC的基因檢測技術(shù)。
本文主要基于顯微操作平臺,用毛細玻璃管獲取單個細胞,然后進行全基因組放大,從而擴增目的基因并檢測突變。同時,我們根據(jù)單細胞尺度上功能蛋白與基因協(xié)同檢測的需要,將單個細胞在芯片上裂解后先進行功能蛋白檢測,然后抽取單個細胞的裂解產(chǎn)物進行基因檢測。最后,我們將基于微流控芯片的外周血中CTC的捕獲技術(shù)與單細胞基因突變檢測相結(jié)合,對肺癌患者進行實際的臨床樣本檢測。我們
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