腦益康對阿爾茨海默病模型的作用及機制研究.pdf

1、第一部分腦益康對AD小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機制研究 目的：研究腦益康對阿爾茨海默病(AD)模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響，并探討其保護神經(jīng)細胞的機制。 方法：本研究采用D．半乳糖(D-Gal)和亞硝酸鈉(NaN02)腹腔注射建立AD小鼠模型。通過電迷宮刺激器和水迷宮實驗檢測小鼠學(xué)習(xí)記憶能力；生化方法檢測小鼠腦組織丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量、單胺氧化酶．B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(G

2、SH-PX)、Na+-K+-ATP酶和Ca2+_Mg2+_ATP酶活性；光鏡和透射電鏡觀察小鼠腦組織病理變化；生化方法提取DNA并電泳分析凋亡細胞的DNA含量；逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測凋亡調(diào)控基因Bax、B細胞白血?。馨土觯?(Bcl-2)、B細胞白血病．淋巴瘤一x1(Bcl-x1)mRNA表達情況。 結(jié)果：腦益康能改善AD小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力；降低AD小鼠腦組織MDA、NO含量和MAO-B活性，升高SOD、G

3、SH-PX、Na+-K+-ATP酶、Ca2+_Mg2+-ATP酶活性；改善AD小鼠腦組織的病理變化；升高AD小鼠腦組織DNA含量，抑制BaxmRNA的表達，并上調(diào)Bcl．2和Bcl-xlmRNA的表達。 結(jié)論： 1．腦益康能改善D-gal和NaN02所致的AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。 2．腦益康通過升高腦組織SOD、GSH-PX活性，提高自由基的清除能力；抑制腦內(nèi)MDA生成，降低脂質(zhì)過氧化損傷程度，抑制氧化應(yīng)激，減

4、輕自由基損傷；減輕神經(jīng)細胞病理變化，保護神經(jīng)細胞。 3．腦益康通過降低腦內(nèi)MAO-B活力，調(diào)節(jié)腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的代謝，改善學(xué)習(xí)記憶障礙。 4．腦益康提高腦組織中Na+．K+-ATP酶和Ca2+_Mg2+_ATP酶活力，調(diào)節(jié)細胞轉(zhuǎn)運功能，防止神經(jīng)細胞死亡；通過上調(diào)Bcl-xl和Bcl-2mRNA的表達，降低BaxmRNA的表達，抑制神經(jīng)細胞凋亡。 第二部分腦益康對D．半乳糖致海馬神經(jīng)細胞損傷的保護作用 目

5、的：研究腦益康對D．半乳糖(D-gal)誘導(dǎo)海馬神經(jīng)細胞損傷的保護作用，并探討其抗氧化、抑制神經(jīng)細胞凋亡的機制。 方法：采用D-gal誘導(dǎo)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)細胞損傷模型，加入不同濃度腦益康藥物血清作用于海馬神經(jīng)細胞。MTT法檢測神經(jīng)細胞存活率；生化法檢測MDA、NO含量和MAO-B、SOD、GSH-PX、Na+_K+．ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性；免疫組化檢測核轉(zhuǎn)錄因子-rBp65(NF-rBp65)的表達，RT-P

6、CR檢測凋亡調(diào)控基因Bax、Bcl-2、Bcl-xlmRNA的表達。 結(jié)果：腦益康能提高D-gal損傷的神經(jīng)細胞的存活率；降低MDA含量和MAO-B活性，升高SOD、GSH-PX、Na+-K+-ATP酶、CaZ+_MgZ+_ATP酶活性；改善神經(jīng)細胞的病理變化；調(diào)節(jié)NF-r,B的表達；抑制BaxmRNA的表達并上調(diào)神經(jīng)細胞Bcl-2和Bcl-xlmRNA的表達。 結(jié)論： 1．腦益康對D-gal誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細胞具

7、有保護作用。 2．腦益康通過升高腦組織SOD、GSH-PX活力，提高自由基的清除能力；抑制腦內(nèi)MDA生成，降低脂質(zhì)過氧化損傷程度，抑制氧化應(yīng)激，減輕自由基損傷；降低MAO-B活力，減少自由基生成，保護海馬神經(jīng)細胞。 3．腦益康提高腦組織中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力，調(diào)節(jié)細胞轉(zhuǎn)運功能，防止神經(jīng)細胞死亡；通過調(diào)節(jié)NF-rB的表達；上調(diào)Bcl-xl和Bcl-2mRNA的表達，下調(diào)BaxmRNA的表