缺血后處理對(duì)缺血再灌注大鼠腎臟細(xì)胞間粘附分子-1、E-選擇素表達(dá)的影響.pdf

1、目的：1)研究缺血后處理是否對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用； 2)初步探討缺血后處理對(duì)腎缺血再灌注損傷保護(hù)作用的機(jī)制。 方法：健康成年雄性wistar大鼠45只，隨機(jī)分N3N：假手術(shù)組(sham operation；SO組)；缺血再灌組(ischemic reperfusion；I/R組)；缺血后處理組(ischemic post-conditioning；PC組)，每組各15只。SO組僅切除右腎，不阻斷左。腎血

2、流；I/R己組行夾閉左腎蒂缺血60分鐘后立即開放循環(huán)，PC組采用缺血60分鐘后，給予重復(fù)6次的10秒再灌注+10秒缺血后再開放循環(huán)；SO組于術(shù)后2、12、24d,時(shí)3個(gè)時(shí)點(diǎn)取左腎組織；其余兩組分別于再灌注后2、12．24小時(shí)3個(gè)時(shí)點(diǎn)取左腎組織，每組每次5只，分別測(cè)定腎組織髓過氧化物酶(Myeloperoxidase enzyme，MPO)活性，應(yīng)用免疫組化染色法觀察腎組織中細(xì)胞間粘附分子—1(intercellular adhesion

3、 molecule-1，ICAM-1)和E選擇素(E-selectin)的表達(dá)情況。于再灌注24小時(shí)后抽取腔靜脈血測(cè)定血清肌酐和尿素氮，腎組織切片光鏡下觀察PMN(中性粒細(xì)胞)浸潤和腎組織的病理變化情況。 結(jié)果：所有選入的wistar大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。1)再灌注24小時(shí)后，I/R組(136.8±52.91umol/L)的血肌酐值明顯高于SO組(63.34±5.06umol/L),有顯著性差異(t=-7.891，P<0.05)

4、；而PC組(78.5±5.63umol/L)明顯低于I/R組，有顯著性差異(t=3.639,P<0.05)；觀察各組血尿素氮值，發(fā)現(xiàn)I/R組(43.38±12.40mmol/L)明顯高于SO組(12.70±2.04mmol/L)，有顯著性差異(t=8.801 P<0.05)，而PC組(18.38±2.25 mmnol/L)明顯低于I/R組，有顯著性差異(t=4.718,P<0.05)。2)再灌注24小時(shí)后腎組織切片光鏡觀察發(fā)現(xiàn),SO組沒

5、見明顯的病理損害和中性粒細(xì)胞浸潤,I/R組的中性粒細(xì)胞浸潤明顯增加,腎小管Paller評(píng)分(88.2±6.97)較SO組(36.40±7.64)明顯增加，有顯著性差異(t=11.20,P<0.05)，而PC組的Paller評(píng)分(67.0±5.96)比I/R瓜組明顯減輕，有顯著性差異(t=5.166,P<0.05)，中性粒細(xì)胞浸潤也明顯減少。3)測(cè)定2、12、24小時(shí)的MPO活性，發(fā)現(xiàn)SO組各時(shí)間點(diǎn)無明顯變化，而再灌注2小時(shí)后，各組結(jié)果比

6、較均無顯著性差異；再灌注12小時(shí)后，I/R組(3.4655±0.5527單位/克 濕片)明顯高于SO組(O.8530±0.2127單位/克 濕片)，有顯著性差異(t=8.732，P<0.01);而PC組(1.8708±0.7511單位/克濕片)明顯低于I/R組(3.4655±0.5527單位/克濕片)，有顯著性差異(t=3.824，P<0.05)；再灌注24小時(shí)后PC組和I/R組的MPO活性分別達(dá)到高峰，而PC組(2.2301±0.37

7、06單位/克濕片)明顯低于I/R組(3.9115±0.9129單位/克濕片)，有非常顯著性差異(t=3.816，P<0.01)。4)觀察E選擇素在腎組織中的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，I/R組和PC組在再灌注2小時(shí)表達(dá)開始增加，在12小時(shí)達(dá)到高峰，IOD值分別為(55.4934±11.8879單位/克濕片)和(27.8970±9.6107單位/克 濕片)，PC組較I/R組明顯降低，具有非常顯著性差異(t=4.037，P<0.01)，而再灌注24d小時(shí)后

8、，PC組較I/R組仍明顯降低，有顯著性差異(t=3.716，P<0.05)。5)觀察ICAM-1在腎組織中的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，I/R組和PC組在再灌注2小時(shí)表達(dá)開始增加，在12d小時(shí)后 PC組較I/R組的IOD值明顯降低，并出現(xiàn)顯著性差異(t=2.132，P<0.05)；在24小時(shí)后，兩組IOD值達(dá)到高峰分別為(58.7707±18.2038)和(25.6030±9.1861)，具有非常顯著性差異(t=3.637，P