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文檔簡介
1、目的:探討不同濃度氯化鉀霧化吸入后不同時(shí)點(diǎn)血清、支氣管肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6、CRP的表達(dá)水平、肺系數(shù)、光鏡下肺組織病理形態(tài)學(xué)改變,為霧化吸入補(bǔ)鉀的安全性提供理論依據(jù),為霧化吸入補(bǔ)鉀治療低鉀血癥的可行性提供循證依據(jù)。
方法:豚鼠購回后適應(yīng)性飼養(yǎng)3日后按照吸入鉀濃度不同將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物計(jì)算機(jī)隨機(jī)(由統(tǒng)計(jì)人員產(chǎn)生隨機(jī)序列)分為A(空白對(duì)照)、B(5%濃度)、C(10%濃度)、D(20%濃度)組。空白對(duì)照組每組5只,實(shí)驗(yàn)組每組1
2、5只,共50只,空白對(duì)照組不做干預(yù),將干預(yù)的B、C、D三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別放入50cm×50cm×50cm不完全密閉的玻璃盒中,霧化吸入氯化鉀20min/次,間隔12h,分別于1d、3d、7d每次每組抽取5只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物留取生化及肺組織標(biāo)本。最后一次霧化吸入補(bǔ)鉀后,按照300mg∕kg劑量腹腔注射10%水合氯醛麻醉,心尖取血5ml,4℃冰水混合物中靜置20min,4℃低溫離心(1800rpm、20min),分離血清測生化指標(biāo)。在無菌條件下行頸正
3、中切口分離氣管,結(jié)扎右側(cè)主支氣管,向左肺內(nèi)注入37℃預(yù)熱生理鹽水2ml反復(fù)灌洗3次,輕壓豚鼠肺部搜集支氣管肺泡灌洗液,回收率大于70%(1800r離心20min),搜集支氣管肺泡灌洗上清液,-80℃凍存。支氣管肺泡灌洗完畢后,斷頭處死動(dòng)物,經(jīng)胸腔取右肺上葉,置于10%中性福爾馬林溶液浸泡固定,48h后酒精依次脫水,二甲苯透明石蠟包埋,4um連續(xù)切片,用蘇木素—伊紅染色,光鏡下觀察肺臟組織形態(tài)學(xué)變化。取右肺下葉組織剔去多余結(jié)締組織,濾紙擦
4、干肺表面液體用電子天平精確稱重即為濕重,將標(biāo)本置入80℃恒溫干燥箱72h至重量恒定,再次稱其重量即為干重,計(jì)算肺濕、干重比,計(jì)算肺系數(shù)。
結(jié)果:1、20%濃度組1d、3d兩個(gè)時(shí)點(diǎn)TNF-a、IL-6在支氣管肺泡灌洗液的表達(dá)水平與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,7d這一時(shí)點(diǎn)方差分析結(jié)果無差別。4組豚鼠支氣管肺泡灌洗液各時(shí)點(diǎn)CRP水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P﹥0.05。
2、四組豚鼠血清TNF-a、IL-6、CRP的表達(dá)以及肺組織
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