槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物的合成及其活性研究.pdf

1、槲皮素是人類膳食中常見的黃酮類化合物,廣泛存在于各種植物中,它具有抗氧化、抗腫瘤、清除自由基等多方面的生物學(xué)作用。關(guān)于槲皮素的研究已經(jīng)是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。鉬屬稀土元素,是人體內(nèi)的必須微量元素之一,在機(jī)體內(nèi)常常作為酶的輔助因子發(fā)揮作用。近年來(lái),在研究中藥的過程中發(fā)現(xiàn)越提純療效越差甚至出現(xiàn)毒副作用的現(xiàn)象,為此,北京大學(xué)曹治權(quán)教授于1995年提出中藥配位學(xué)說(shuō)。該學(xué)說(shuō)認(rèn)為,天然藥物的藥理活性大都是其有機(jī)物與礦物質(zhì)之間形成配合物而產(chǎn)生的

2、協(xié)同作用。雖然關(guān)于槲皮素與過渡元素形成配合物的合成及生物活性研究已有相關(guān)報(bào)道,但槲皮素與過渡元素鉬的合成及其活性研究尚未見報(bào)道。
　　本研究在前人工作的基礎(chǔ)上采用單因素法及多因素正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)槲皮素與鉬反應(yīng)的最佳摩爾比、pH值、溫度、時(shí)間進(jìn)行了研究,在最佳反應(yīng)條件下合成出槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物,并對(duì)其合成產(chǎn)物的紫外光譜、紅外光譜、配位比、急性毒性、遺傳毒性、抗超氧陰離子自由基(O2-·)及羥基自由基(·OH)的性質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定。目的1

3、、探討槲皮素與鉬(Ⅵ)的最佳反應(yīng)條件,合成槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物并對(duì)其紫外、紅外光譜及配位比進(jìn)行測(cè)定,推測(cè)其可能的結(jié)構(gòu);2、對(duì)其目的產(chǎn)物槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物的毒性進(jìn)行測(cè)定;3、初步探討槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物對(duì)O2-·和·OH的清除作用。方法1、以槲皮素和鉬酸銨為原料,分別采用單因素實(shí)驗(yàn)法和正交實(shí)驗(yàn)法綜合考察槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物合成的最佳酸度、原料的物質(zhì)量比、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間。在最佳條件下,合成出槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物,并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)

4、行表征;2、分別采用小鼠急性毒性試驗(yàn)和小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)考察槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物的急性毒性和遺傳毒性;3、分別采用鄰苯三酚自氧化法和水楊酸法觀察槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物對(duì)O2-·和·OH的清除作用,并與槲皮素進(jìn)行比較;4、數(shù)據(jù)用(?)±s表示,采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重進(jìn)行t檢驗(yàn),對(duì)骨髓細(xì)胞微核率進(jìn)行x2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1、槲皮素和鉬(Ⅵ)在pH為2.0的反應(yīng)溶液中,以物質(zhì)的量比1.5:2.0(槲皮素

5、和Mo(Ⅵ)),30℃反應(yīng)8h,配合物合成產(chǎn)率最大,約達(dá)到90％。并通過紫外光譜、紅外光譜及配位比分析推測(cè)出配合物的結(jié)構(gòu);通過摩爾比法和平衡移動(dòng)法計(jì)算出槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物的表觀穩(wěn)定常數(shù)為K穩(wěn)=1.0×108;2、急性毒性實(shí)驗(yàn)期間未觀察到小鼠有死亡及任何中毒表現(xiàn),且槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物對(duì)小鼠經(jīng)口LD(50)大于10.00g·kg-1;骨髓細(xì)胞微核率經(jīng)x2檢驗(yàn),陽(yáng)性對(duì)照組高于陰性對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(P<0.05),實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組微核率

6、均在正常值范圍內(nèi),二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=3.288,P=0.511);3、在低濃度時(shí),槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物對(duì)O2-·的清除作用高于槲皮素,在高濃度時(shí),槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物對(duì)O2-·的清除作用低于槲皮素。對(duì)·OH的清除作用受濃度影響較大,不論高濃度還是低濃度,槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物的清除作用均優(yōu)于槲皮素。結(jié)論1、本研究建立了槲皮素與鉬(Ⅵ)的最佳配位反應(yīng)條件,在此條件下,合成出槲皮素-鉬(Ⅵ)配合物,并推測(cè)出其結(jié)構(gòu);2、新合成的