TIMP-1在肺癌病人中的表達及維拉帕米對MMP-9和Lewis肺癌的抑制作用.pdf

1、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloproteinases，MMPs)是鋅依賴性細胞外基質(zhì)降解酶家族之一，在惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移中起重要作用，其中MMP-9對肺癌的作用較為顯著。金屬蛋白酶組織抑制因子(Tissue Inhibitor ofMetalloproteinases，TIMPs)是MMPS特異性抑制因子，其中TIMP-1主要抑制MMP-2和MMP-9的活性。但是，采用多種方法檢測肺癌中TIMP-1的表達，均顯示其在肺癌

2、中水平顯著升高，提示TIMP+1作為MMPs的抑制因子而抑制腫瘤生長似乎是不可能的。同時，國外對于人工合成的MMPs抑制劑(Matrix Metalloproteinases Inhibitor,MMPI)進行了臨床試驗，表明其在進展期肺癌的治療中并無明顯意義。但我們并未放棄研究，不但發(fā)現(xiàn)TIMP-1的臨床價值，還尋找了新的MMPI——維拉帕米，以期在肺癌診斷和治療上獲得初步成就。 第一部分：TIMP-1在肺癌病人中的表達及其臨

3、床意義。采用ELISA方法，檢測40例肺癌病人和50例非腫瘤病人血清TIMP-1水平，予以比較，并進行多元回歸分析以及受試者工作特征(Receiver Operating Characteristic，ROC)曲線繪制，計算曲線下面積。結(jié)果顯示肺癌病人血清TIMP-1平均水平顯著高于非腫瘤病人(0.7765 ng·ml<'-1> VS 0.6580 ng·ml<'-1>，P<0.05)。以病理診斷為金標準，TIMP-1的ROC曲線下面積

4、達0.6930，靈敏度為73.6％，特異度為65.8％。因此血清TIMP-1是診斷肺癌的一個候選標記物。 第二部分：維拉帕米對Lewis肺癌的抑制作用以及對MMP-9表達的影響。建立Lewis肺癌模型，將其分為四組：A組為對照組，B組為維拉帕米0.15mg·d<'-1>劑量組，C組為0.20mg·d<'-1>劑量組，D組為0.25mg·d<'-1>劑量組。采用ELISA方法檢測各實驗組小鼠血清中MMP-9的濃度，采用免疫組化Da

5、ko EnVison二步法檢測瘤組織中MMP-9的表達。并計數(shù)肺表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)，瘤塊稱重，計算腫瘤轉(zhuǎn)移抑制率以及腫瘤生長抑制率。并進行MMP-9濃度和瘤重相關(guān)性分析、MMP-9濃度和肺表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)相關(guān)性分析。結(jié)果顯示，維拉帕米能明顯降低瘤組織中MMP-9的表達(P<0.01)，且當維拉帕米劑量為0.25mg·d<'-1>或0.20mg·d<'-1>時，維拉帕米能明顯降低小鼠血清中MMP-9的濃度(P<0.05)，腫瘤生長和轉(zhuǎn)移作用也受