人AWP1與整合素αV胞內(nèi)功能域的相互作用及其生物學(xué)功能的初步鑒定.pdf

1、用人Ubiquitin結(jié)合酶CDC34作誘餌,從一酶母雙雜交系統(tǒng)中分離出來的陽性克隆之一,能夠與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的PRK1(protein kinase C related kinase 1,PRK1,又稱PKN)共免疫沉淀.因此,這一與PRK1相關(guān)的、新鑒定的蛋白就被命名為AWP1(associated with PRK1,AWP1).PRK1是一種由脂質(zhì)激活的絲/蘇氨酸激酶,它通過N端與小G蛋白R(shí)hoA結(jié)合,并以GTP依賴模式被激活.P

2、RK1能與多種細(xì)胞分子,主要是結(jié)構(gòu)蛋白,如Vimentin,α-actinin和neurofilament protein等,或相關(guān),或相互作用,并參與細(xì)胞凋亡.從APW1的蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)域分析可以看出,AWP1具有與多種蛋白質(zhì)分子相互作用的潛能.因此,AWP1能夠通過調(diào)節(jié)PRK1的亞細(xì)胞定位或調(diào)節(jié)PRK1與其調(diào)節(jié)劑或/和作用底物的相互作用而參與復(fù)雜的細(xì)胞信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié),擔(dān)當(dāng)一個(gè)信號(hào)分子的角色.整合素是由非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)α亞基和β亞基組成的

3、異二聚體,αV亞基是整合素家族獨(dú)特的成員之一,能與至少5種不同的β亞基相聯(lián)結(jié),使其成為廣泛表達(dá)的整合素亞基,參與細(xì)胞遷移、增殖、分化和包括特殊的基因轉(zhuǎn)錄在內(nèi)的細(xì)胞反應(yīng),尤其在腫瘤惡性轉(zhuǎn)移和新生血管形成中具有特殊的地位.蛋白質(zhì)氨基酸序列以及cDNA核苷酸序列的計(jì)算機(jī)比較分析顯示,CDC34與整合素αV亞基胞漿內(nèi)段之間存在許多相似的序列.該室的合作者美國Scrippt研究室利用的新蛋白,剛好也是AWP1蛋白.因此,我們選擇整合素αV亞基胞漿