吡格列酮對(duì)軟脂酸誘導(dǎo)的HIT-T15細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)及功能的改變的影響.pdf

1、目的: 1.觀察吡格列酮(PIO)對(duì)軟脂酸誘導(dǎo)的HIT-T15細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)、細(xì)胞的凋亡及胰島素分泌的改變的影響。 2.觀察軟脂酸和PIO對(duì)HIT-T15細(xì)胞的ATP、過氧化物酶體增值物激活受體γ共激活因子(PGC-1mRNA)和核呼吸因子-1(NRF-1mRNA)表達(dá)的影響。 3.探討PIO保護(hù)β細(xì)胞的機(jī)制。 方法:以倉(cāng)鼠胰島素瘤細(xì)胞株HIT-T15細(xì)胞作為β細(xì)胞，游離脂肪酸以軟脂酸(palmitate

2、)為代表，分為以下幾組：1：正常對(duì)照；2：0.5mmol/lFFA；3：0.5mmol/lFFA+PIO10-7mol/l；4：0.5mmol/lFFA+PIO10-5mol/l；5：1.0mmol/lFFA；6：1.0mol/lFFA+PIO10-7mol/l；7：1.0mmol/lFFA+PIO10-5mol/l，分別觀察下述指標(biāo)：1.透射電鏡觀察細(xì)胞及線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變。2.凋亡：分別用流式細(xì)胞儀和原位末端標(biāo)記法(tunnel)

3、檢測(cè)凋亡率。3.高效液相色譜法檢測(cè)細(xì)胞ATP、ADP改變。4：RT-PCR檢測(cè)PGC-1mRNA、NRFmRNA表達(dá)的變化。5：放免法測(cè)正糖培養(yǎng)48小時(shí)基礎(chǔ)胰島素和高濃度葡萄糖刺激后1小時(shí)胰島素分泌量(GSIS)。 結(jié)論: 1.軟脂酸能使HIT-T15細(xì)胞線粒體腫脹，凋亡增加，ATP/ADP比率下降，GSIS下降，上述改變可能和PGC-1和NRF-1的改變有關(guān)。 2.PIO能改善上述作用：減輕線粒體腫脹，降低凋亡