吡格列酮對(duì)3T3 L1前脂肪細(xì)胞功能的影響初步研究.pdf

1、目的：觀察吡格列酮培養(yǎng)的前脂肪細(xì)胞增殖和分化情況,檢測(cè)細(xì)胞上清液中apelin濃度的變化,探討噻嘩烷二酮類(lèi)藥物對(duì)脂肪組織內(nèi)分泌功能的影響機(jī)制。
　　 方法：分別用含有四個(gè)不同濃度的吡咯列酮的基礎(chǔ)培養(yǎng)液進(jìn)行前脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng),48小時(shí)后用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液apelin濃度,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,尋找有效的吡格列酮干預(yù)濃度。根據(jù)培養(yǎng)液不同而設(shè)立空白對(duì)照組A、分化對(duì)照組B、實(shí)驗(yàn)組C三組,在干預(yù)后的第24、48、72小時(shí)分

2、別以ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清液apelin濃度,并觀察細(xì)胞增殖、聚脂分化指標(biāo)。后續(xù)于分化第5、10天取三組細(xì)胞,測(cè)定其油紅O染色吸光度值。評(píng)價(jià)各組處理對(duì)前脂肪細(xì)胞apelin分泌水平、細(xì)胞增殖分化指標(biāo)的影響。
　　 結(jié)果:1、A、B及C組上清液中可檢測(cè)到apelin,并隨培養(yǎng)時(shí)間而變化,B組、C組培養(yǎng)72小時(shí)后apelin濃度較A組分別增加了33.7％、32.5％(P<0.05)。2、對(duì)細(xì)胞分化的影響:油紅O染色測(cè)定結(jié)果表明,吡

3、格列酮濃度分別為10μmol/l_.,100μmol/L時(shí)其吸光度值大于對(duì)照組。在第24、48小時(shí),C組油紅O染色吸光度值與B組比較無(wú)明顯差異；第72小時(shí),C組吸光度值高于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但低于B組；而在第10天B、C兩組差異不明顯(P≥0.05),但與A組比較,其差異仍較明顯(P<0.05)。C組培養(yǎng)前脂肪細(xì)胞約3天,部分細(xì)胞胞漿內(nèi)可見(jiàn)脂滴,干預(yù)5d、10d時(shí)能促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的胞漿內(nèi)聚脂,結(jié)果較A組分別增加了3

4、6.8％、59.8％(P<0.05)。3、對(duì)細(xì)胞增殖的影響:MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示,隨吡格列酮濃度增加,前脂肪細(xì)胞數(shù)有增加趨勢(shì),100μmol/L吡格列酮明顯促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的增殖,在24、48、72小時(shí)細(xì)胞增殖較對(duì)照組分別增加了8.1％、20.2％和15.2％(P<0.05)。
　　 結(jié)論：前脂肪細(xì)胞可分泌脂肪因子apelin,其表達(dá)水平與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)有關(guān)。吡格列酮可促進(jìn)前脂肪細(xì)胞增殖和分化,促增殖作用呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性,其促分化