狼瘡性腎炎患者HMGB1和RAGE的表達(dá)及糖皮質(zhì)激素的作用.pdf

1、背景與目的：
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種累及多系統(tǒng)、多器官的自身免疫病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜多樣，狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）是SLE患者的主要死因。高遷移率族蛋白B1（high mobility group box protein B1，HMGB1）是一種染色質(zhì)蛋白，胞外HMGB1作為一種晚期促炎細(xì)胞因子，刺激細(xì)胞因子的釋放。晚期糖基化終末產(chǎn)物受體

2、（receptor for advanced glycation end products，RAGE）是HMGB1的主要受體，兩者結(jié)合后通過核轉(zhuǎn)錄因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）的活化介導(dǎo)一系列炎癥反應(yīng)。本研究通過檢測LN患者體內(nèi)HMGB1和RAGE的表達(dá)，探討其在疾病發(fā)病機(jī)制中的作用，同時(shí)觀察了糖皮質(zhì)激素（glucocorticoid，GC）對LN患者體內(nèi)HMGB1表達(dá)的影響，為其治療LN提供新的視角。

3、>　　方法：
　　收集2013年4月～2014年6月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎臟內(nèi)科、風(fēng)濕科、皮膚科共64例SLE住院患者血清（其中47例患者同時(shí)留取尿液）。所選患者均符合1997年美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(American rheumatism association，ARA)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。收集10例門診健康體檢者的血清和尿液作為SLE患者血清和尿液的正常對照。ELISA法檢測實(shí)驗(yàn)對象血清及尿液HMGB1的水平。64例患者中有25

4、例行腎組織活檢（II型6例，III型4例，IV型10例，IV+V型5例），選取10例我院泌尿外科腎腫瘤切除患者遠(yuǎn)離腫瘤部位至少2 cm的腎組織作為SLE患者腎組織的正常對照。免疫組化法檢測實(shí)驗(yàn)對象腎組織的HMGB1和RAGE的表達(dá)水平。（1）采用2000年SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)（SLE disease activity index，SLEDAI-2000）進(jìn)行評分?！?0分為活動(dòng)期，<10分為穩(wěn)定期，將 SLE組按疾病活動(dòng)性分為活動(dòng)期SL

5、E組（血標(biāo)本n=47，尿標(biāo)本n=33）和穩(wěn)定期 SLE組（血標(biāo)本n=17，尿標(biāo)本n=14）；比較活動(dòng)組與穩(wěn)定組患者體內(nèi)HMGB1的表達(dá)水平。（2）SLE組以尿常規(guī)出現(xiàn)血尿（尿紅細(xì)胞數(shù)>5個(gè)/HP）、管型尿或蛋白尿（24 h尿蛋白定量>0.3 g或+++）為狼瘡腎損害，以無血尿、管型尿、蛋白尿（24 h尿蛋白定量<0.3 g）為狼瘡無明顯腎臟損害，故SLE組按尿常規(guī)結(jié)果分為狼瘡腎損害組（血標(biāo)本n=37，尿標(biāo)本n=28）和狼瘡無明顯腎損害組

6、（血標(biāo)本 n=27，尿標(biāo)本 n=19），比較兩組間 HMGB1的表達(dá)差異。（3）LN組按GC給藥時(shí)間分為GC未治療組（初診初治未曾使用過激素及免疫抑制劑者；n=11）和GC治療組（激素治療時(shí)間>2周，GC使用劑量為1mg/kg/d，但未曾使用其他免疫抑制劑者；n=13）,分析GC對患者體內(nèi)HMGB1表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果：
　　1．SLE患者血清HMGB1的水平顯著高于正常對照者（P<0.01）?；顒?dòng)期SLE患者顯著高于

7、穩(wěn)定期SLE患者（P<0.05）。狼瘡腎損害者顯著高于狼瘡無明顯腎損害者（P<0.05）。在SLE患者中，血清HMGB1水平與SLEDAI評分、24 h尿蛋白定量呈正相關(guān)性（r=0.26，P<0.05；r=0.55，P<0.05）。
　　2．SLE患者尿液HMGB1的水平顯著高于正常對照者（P<0.01）。活動(dòng)期SLE患者顯著高于穩(wěn)定期患者（P<0.05）。狼瘡腎損害者較狼瘡無明顯腎損害者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在SLE

8、患者中，尿液HMGB1水平與SLEDAI評分呈正相關(guān)（r=0.35，P<0.05）。
　　3．正常對照者腎組織腎小管上皮細(xì)胞可中等強(qiáng)度表達(dá)HMGB1和RAGE，腎小球未見表達(dá)，而在 SLE患者可見小管中表達(dá)有所增強(qiáng)，小球中也明顯表達(dá)，其腎內(nèi)的HMGB1和RAGE的表達(dá)水平較正常對照者明顯增加（P<0.05），且IV型、IV+V型SLE患者腎內(nèi)HMGB1的表達(dá)量均明顯高于II型（P<0.05），IV型SLE患者腎內(nèi)RAGE的表達(dá)量高