Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒干預(yù)人惡性黑色素瘤細(xì)胞的體外研究.pdf

1、目的：制備Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒，利用其RNA干擾作用，沉默人惡性黑色素瘤細(xì)胞Ang2基因的表達(dá)，體外研究其對人惡性黑色素瘤細(xì)胞中Ang2基因表達(dá)的抑制效率，為后期進(jìn)一步進(jìn)行裸鼠惡性黑色素移植瘤的血管生成和腫瘤生長的體內(nèi)靶向性干預(yù)實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)，為Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒在腫瘤靶向基因治療中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1.制備Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒。
　　2.Ang

2、2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒體外轉(zhuǎn)染人惡性黑色素瘤細(xì)胞。
　　3.利用倒置熒光顯微鏡觀察人惡性黑色素瘤細(xì)胞紅色熒光蛋白表達(dá)情況，細(xì)胞計(jì)數(shù)并分析轉(zhuǎn)染效率。
　　4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測人惡性黑色素瘤細(xì)胞中Ang2基因的表達(dá)量，進(jìn)而得到RNAi沉默Ang2基因表達(dá)的效率。
　　結(jié)果：1、成功制備Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒。
　　2、利用倒置熒光顯微鏡觀察，轉(zhuǎn)染成功的人惡性黑色素瘤細(xì)胞發(fā)出紅色

3、熒光。
　　3、當(dāng)質(zhì)粒與殼聚糖磁性納米微粒質(zhì)量比為1:100時(shí)，Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒轉(zhuǎn)染人惡性黑色素瘤細(xì)胞的效率最高，可達(dá)61.17％。
　　4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果：Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒可有效沉默人惡性黑色素瘤細(xì)胞中Ang2基因的表達(dá)，其Ang2基因表達(dá)抑制效率可達(dá)到59.56%（P<0.05）。
　　結(jié)論：Ang2-siRNA質(zhì)粒殼聚糖磁性納米微粒能以較高的轉(zhuǎn)染效率在體