吉非替尼和多西他賽的不同次序給藥對(duì)NSCLC細(xì)胞的影響.pdf

1、根據(jù)臨床前資料，表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)和化療藥物有協(xié)同抗腫瘤作用。然而，多中心III期隨機(jī)臨床試驗(yàn)顯示，EGFR-TKIs聯(lián)合化療一線治療晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者并沒(méi)有改善生存率。近年來(lái)關(guān)于EGFR-TKIs和化療的序貫治療的臨床研究中取得了比單純化療較好的療效，但選擇先用哪個(gè)治療療效會(huì)更加目前不是很清楚。本實(shí)驗(yàn)不同次序給予EGFR-TKIs-吉非替尼和化療藥-多西他賽，通過(guò)檢測(cè)不同EGFR基因

2、型細(xì)胞PC-9、PC-9/G、A549的存活率、周期及凋亡，探索不同次序給藥是否出現(xiàn)差異、以及出現(xiàn)差異的可能的機(jī)制，為臨床序貫用藥提供理論參考。
　　吉非替尼和多西他賽按不同濃度梯度分別抑制三種細(xì)胞，MTT法檢測(cè) PC-9、PC-9/G、A549的增殖，作圖法計(jì)算出藥物半數(shù)抑制濃度(IC50)；每種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)均分為5組：對(duì)照組、吉非替尼組(G)、多西他賽組(D)、先用吉非替尼后用多西他賽組(G-D)、先用多西他賽后用吉非替尼組(D-

3、G)；MTT法檢測(cè)5組細(xì)胞的增殖，按公式計(jì)算細(xì)胞存活率；細(xì)胞凋亡試劑盒(Annexin V/PE)標(biāo)記和細(xì)胞周期試劑盒(PI)染色，利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡和周期以及最后利用Multicycler3.0軟件分析細(xì)胞周期。
　　得到如下結(jié)果：
　　1.吉非替尼和多西他賽分別對(duì)三種細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用呈濃度依賴性；
　　2.三種細(xì)胞的不同次序給藥組對(duì)抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)作用均強(qiáng)于單藥組，D-G組較G-D組細(xì)胞存活率顯著減少；

4、>　　3.三種細(xì)胞的D-G組可使細(xì)胞阻滯在 G2/M期，G-D組可使細(xì)胞阻滯在 G0/G1期；
　　4. PC-9和PC-9/G的G-D組減少D組誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，D-G組比G-D組細(xì)胞凋亡率明顯增多； A549的G-D組與D組或G-D組與D-G組均沒(méi)有差異。
　　提示：
　　1.先用多西他賽后用吉非替尼為最佳序貫給藥方案；
　　2.對(duì)EGFR突變型細(xì)胞來(lái)說(shuō)，先用多西他賽后用吉非替尼的強(qiáng)效作用可能與抗增殖、細(xì)胞周期