吉非替尼按時(shí)辰給藥的藥理作用特點(diǎn)及其機(jī)制研究.pdf

1、目的: 初步探討吉非替尼按時(shí)辰給藥荷瘤小鼠的藥理作用特點(diǎn)及其作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.建立肺癌小鼠模型并分組:利用C57BL/6小鼠建立lewis肺癌小鼠模型，將荷瘤小鼠隨機(jī)分成13組(n=10)，即A～F六個(gè)實(shí)驗(yàn)組、a～f六個(gè)空白組和對(duì)照組;A～F實(shí)驗(yàn)組分別在8:00、12:00、16:00、20:00、24:00、次日4:00以灌胃方式給藥(100 mg·kg-1)，空白組和對(duì)照組給予相同劑量的含有5％羧甲基纖維素

2、鈉的蒸餾水。
　　2.日常指標(biāo)的測(cè)定:連續(xù)給藥時(shí)間21天，每天觀察并記錄各組小鼠生存狀態(tài)及出現(xiàn)肛周紅腫的小鼠數(shù)量，每三天測(cè)定一次小鼠腫瘤體積，三周后在相應(yīng)的時(shí)間進(jìn)行眼眶取血并脫臼處死小鼠，剝離腫瘤并稱量瘤重，計(jì)算抑瘤率。
　　3.血常規(guī)檢測(cè):各組每只荷瘤小鼠取50μl血液進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)。
　　4.腫瘤組織和皮膚組織的觀察:對(duì)剝離的腫瘤同時(shí)進(jìn)行病理學(xué)分析以及掃描電鏡分析，同時(shí)對(duì)部分皮膚組織進(jìn)行掃描電鏡觀察。
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3、.細(xì)胞因子的測(cè)定:應(yīng)用ELISA技術(shù)（按照美國(guó)Biolegend公司試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求）測(cè)定不同組的小鼠血液中細(xì)胞因子IL-6、IL-2和TNF-α水平。
　　6.基因表達(dá)的測(cè)定:應(yīng)用RT-PCR技術(shù)測(cè)定腫瘤組織中EGFR、MMP-9、ABCG2和P35基因表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.吉非替尼對(duì)小鼠的生存質(zhì)量有一定的影響，A、B、F組的小鼠精神狀態(tài)和身體狀況比C、D、E組好，A組和F組荷瘤小鼠的肛周紅腫率較其它實(shí)驗(yàn)組低

4、。
　　2.吉非替尼可以明顯抑制腫瘤的增長(zhǎng)，在所有的實(shí)驗(yàn)組中，A組荷瘤小鼠的腫瘤體積增長(zhǎng)最緩慢(P＜0.05)，A組的抑瘤率最高，C組最低(44.12％ vs14.15％，x2=36.00，P=0.000)，F(xiàn)組次之;病理學(xué)分析和掃描電鏡分析顯示A組和F組腫瘤組織壞死最嚴(yán)重，該組的上皮細(xì)胞損傷程度較其它實(shí)驗(yàn)組輕。
　　3.血常規(guī)分析各組白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中的

5、IL-6、IL-2和TNF-α含量升高。A組和F組血清中的IL-6、IL-2和TNF-α水平最接近對(duì)照組的水平，C組和D組含量最高，差異顯著（P＜0.05）。
　　4.時(shí)辰給藥荷瘤小鼠對(duì)EGFR基因表達(dá)影響不同，A組EGFR表達(dá)最低，C、D組EGFR基因表達(dá)相對(duì)較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）?？瞻捉M間EGFR基因表達(dá)呈節(jié)律性變化，12:00左右時(shí)表達(dá)最高，20:00左右時(shí)EGFR表達(dá)最低。各實(shí)驗(yàn)組中MMP-9、ABCG2和