吉西他濱與厄洛替尼不同用藥模式對(duì)人肺癌細(xì)胞株的作用研究.pdf

1、肺癌是我國(guó)目前發(fā)病率與死亡率均位居首位的惡性腫瘤。綜合治療在肺癌的治療中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用，其中的一個(gè)重大進(jìn)展是分子靶向治療藥物的成功應(yīng)用。厄洛替尼是一種小分子表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑，2004年11月被美國(guó)FDA(Food and Drug Administration，食品藥品管理局)批準(zhǔn)用于治療晚期非小細(xì)胞肺癌，是目前肺癌分子靶向治療中較為成熟的藥物。如何將靶向藥物與化療聯(lián)合應(yīng)用以提高抗腫瘤效應(yīng)是目前研究的熱點(diǎn)。吉西他

2、濱是核苷類(lèi)抗代謝類(lèi)藥物，主要作用于DNA合成期的腫瘤細(xì)胞，可以使DNA鏈合成停止，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。吉西他濱聯(lián)合鉑類(lèi)是目前非小細(xì)胞肺癌標(biāo)準(zhǔn)的一線化療方案之一。既往的文獻(xiàn)中，對(duì)于表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑和化療藥物聯(lián)合應(yīng)用增效的報(bào)道不一。本研究旨在通過(guò)觀察吉西他濱與厄洛替尼不同聯(lián)合用藥模式對(duì)人肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)的影響，探索二者不同用藥模式增效的可能性；并通過(guò)應(yīng)用電鏡觀察細(xì)胞微結(jié)構(gòu)、PCR和基因測(cè)序法檢測(cè)細(xì)胞EGFR和K-ras基因突變、

3、Western blot技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞p-AKT和CDK2的表達(dá)、以及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡的方法，初步探討聯(lián)合用藥增效的機(jī)制。
　　本研究包括兩部分內(nèi)容：(1)吉西他濱與厄洛替尼不同用藥模式對(duì)人肺癌細(xì)胞株生長(zhǎng)抑制作用的觀察；(2)吉西他濱與厄洛替尼不同用藥模式對(duì)GLC-82細(xì)胞的作用機(jī)理初探。
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn)吉西他濱和厄洛替尼以不同用藥模式聯(lián)合，在不同的腫瘤細(xì)胞株中表現(xiàn)出不同的相互作用。吉西他濱和厄洛替尼同時(shí)給藥的用藥模

4、式在4種細(xì)胞中均觀察到了協(xié)同作用，而序貫給藥的方式在4種細(xì)胞中結(jié)果不同。我們進(jìn)一步探討了吉西他濱與厄洛替尼不同用藥模式對(duì)GLC-82細(xì)胞的作用機(jī)理。結(jié)果表明，GLC-82細(xì)胞經(jīng)厄洛替尼處理后可明顯增加細(xì)胞的自噬現(xiàn)象，可能與厄洛替尼阻斷PI3K/Akt/mTOR通路相關(guān)。厄洛替尼與吉西他濱聯(lián)合應(yīng)用在GLC-82細(xì)胞中表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)，可能與厄洛替尼阻斷PI3K-PTEN-Akt通路及抑制CDK2蛋白的表達(dá)存在相關(guān)性。通過(guò)以上結(jié)果，我們認(rèn)為：