華蟾素聯(lián)合吉西他濱對(duì)人NSCLC細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)將人非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)細(xì)胞株HCC827進(jìn)行傳代培養(yǎng)、CCK8藥敏試驗(yàn)、利用流式細(xì)胞法測(cè)定其凋亡及細(xì)胞周期，檢測(cè)華蟾素聯(lián)合吉西他濱對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及對(duì)其細(xì)胞周期的影響，探討華蟾素在人NSCLC個(gè)體化治療中的意義，期望為華蟾素作為治療人非小細(xì)胞肺癌的輔助藥物提供新的理論依據(jù)。
　　方法：實(shí)驗(yàn)組先利用HCC827細(xì)胞株進(jìn)行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗(yàn)以及流式細(xì)胞法測(cè)定其細(xì)胞周期，從而檢測(cè)華蟾素聯(lián)合吉

2、西他濱對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及對(duì)其細(xì)胞周期的影響。對(duì)照組利用人HCC827細(xì)胞株進(jìn)行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗(yàn)以及流式細(xì)胞法測(cè)定細(xì)胞周期，以此檢測(cè)吉西他濱對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及對(duì)其細(xì)胞周期的影響。對(duì)照組利用HCC827細(xì)胞株進(jìn)行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗(yàn)以及流式細(xì)胞法測(cè)定細(xì)胞周期，以此檢測(cè)華蟾素對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及對(duì)其細(xì)胞周期的影響。
　　結(jié)果：⑴單用吉西他濱對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及細(xì)胞周期的

3、影響：吉西他濱處理24小時(shí)，在0.0025-0.04uM的濃度范圍內(nèi)可以造成10％左右的細(xì)胞生存率的降低，0.08-0.32uM濃度范圍內(nèi)可以造成約20％左右細(xì)胞生存率降低，這說明在一定程度上，吉西他濱對(duì)HCC827細(xì)胞具有殺傷及促進(jìn)細(xì)胞死亡的作用，并且隨著其濃度的增加，其殺傷及促進(jìn)細(xì)胞死亡的作用就越明顯，抑制率就越高，細(xì)胞的存活率也就越低，從而達(dá)到的抗腫瘤效果也越好；使用吉西他濱單獨(dú)處理，盡管可以在一定程度上促進(jìn)細(xì)胞的DNA合成及有絲

4、分裂（即在細(xì)胞增殖上具有促進(jìn)作用），但它最終會(huì)使總體細(xì)胞數(shù)量減少，因?yàn)樵诖龠M(jìn)增值的同時(shí)，它也會(huì)誘導(dǎo)大量的細(xì)胞凋亡。⑵單用華蟾素對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及細(xì)胞周期的影響：華蟾素對(duì)HCC827細(xì)胞活力具有抑制作用，并且這種抑制作用呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。顯微鏡下觀察到華蟾素處理能呈劑量依賴性地減少細(xì)胞數(shù)量，但最終死亡細(xì)胞并無明顯的增多；華蟾素單獨(dú)處理能促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入DNA合成期（S期），但最終細(xì)胞卻不能完全發(fā)生有絲分裂，因?yàn)榧?xì)胞分裂在G2/

5、M期被阻滯，同時(shí)與對(duì)照組相對(duì)比無明顯細(xì)胞凋亡，因此總的效應(yīng)為細(xì)胞數(shù)量的減少。⑶吉西他濱聯(lián)合不同稀釋倍數(shù)的華蟾素對(duì)HCC827細(xì)胞的抑制率及細(xì)胞周期的影響：吉西他濱(0.04 uM)和華蟾素（20、40、80、160倍稀釋）藥物單用均可以降低HCC827細(xì)胞活力，而華蟾素聯(lián)合吉西他濱可以進(jìn)一步降低HCC827細(xì)胞活力，提高細(xì)胞生存抑制率；華蟾素聯(lián)合吉西他濱對(duì)細(xì)胞周期的影響比較復(fù)雜，聯(lián)合處理能夠?qū)?xì)胞進(jìn)入DNA合成期（S期）進(jìn)行抑制，但最終