2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的：DAPK3是本研究組于2011年利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選出來(lái)的LOH12CR1可能的直接互作蛋白。LOH12CR1可能是一抑癌基因，但其具體生物學(xué)功能及作用機(jī)制尚不清楚。驗(yàn)證LOH12CR1和DAPK3在細(xì)胞內(nèi)是否真正存在互作關(guān)系，為L(zhǎng)OH12CR1功能的研究提供切入點(diǎn)。
　　 方法：
　　 1.構(gòu)建pCDNA3.1-myc-his-LOH12CR1、pCMV-tag2-DAPK3重組載體，并對(duì)HEK293細(xì)胞共轉(zhuǎn)染

2、LOH12CR1和DAPK3重組載體，利用免疫共沉淀技術(shù)驗(yàn)證兩者在細(xì)胞內(nèi)的的相互作用;
　　 2.將LOH12CR1和DAPK3共轉(zhuǎn)染于HEK293細(xì)胞，通過激光共聚焦技術(shù)觀察兩者在HEK293內(nèi)的免疫熒光亞細(xì)胞水平共定位情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)顯示LOH12CR1與DAPK3在HEK293細(xì)胞內(nèi)存在相互作用;
　　 2.免疫熒光亞細(xì)胞共定位實(shí)驗(yàn)初步提示LOH12CR1和DAPK3存

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