SD大鼠腦缺血再灌注后Smad3和Smad7表達的變化及丹紅注射液干預(yù)的影響.pdf

1、目的:研究SD大鼠腦缺血再灌注后Smad3和Smad7在腦組織中表達的動態(tài)變化，分析二者之間可能的關(guān)系，探討其在腦缺血再灌注中的作用及丹紅注射液干預(yù)對它們的影響。
　　 方法:將250g-320g雄性健康SD大鼠60只，隨機劃分成四組:正常對照組(normalgroup)(n=10)，假手術(shù)組(sham-operatedgroup)(n=10)和腦缺血再灌注組(I/Rgroup)(n=20)，丹紅注射液藥物干預(yù)組(n=20)。應(yīng)

2、用Longa法建立SD大鼠大腦中動脈缺血兩小時再灌注模型，其中IR組和藥物干預(yù)組又分為四個亞組，每個亞組5只動物，分別是:6小時組、1天組、3天組、7天組。按Bedersonl的5級評分法來評價手術(shù)后SD大鼠的神經(jīng)功能缺損。應(yīng)用HE染色法觀察大鼠腦組織病理學(xué)變化情況;應(yīng)用免疫組織化學(xué)法來檢測Smad3、Smad7的陽性細胞表達水平的動態(tài)變化。試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.丹紅注射

3、液干預(yù)組大鼠的神經(jīng)功能缺損評分明顯優(yōu)于同時間點的缺血再灌注損傷組，且丹紅注射液干預(yù)7天組神經(jīng)功能缺損評分明顯優(yōu)于其余各時間點干預(yù)組(P＜0.05)。
　　 2.HE染色:假手術(shù)組和正常對照組可見SD大鼠腦組織中神經(jīng)元結(jié)構(gòu)及形態(tài)正常、無間質(zhì)水腫、沒有明顯的梗塞灶。SD大鼠缺血2小時(2h)后再灌注6h、1d、3d、7d時，腦組織石蠟切片HE染色光鏡觀察，隨缺血時間增加，神經(jīng)元變性、壞死加重，膠質(zhì)細胞增生明顯。相同時間點相比，丹紅注

4、射液干預(yù)組腦組織損傷程度均明顯輕于腦缺血再灌注組。
　　 3.免疫組織化學(xué)結(jié)果:(1)在正常對照組與假手術(shù)組SD大鼠腦組織中可見少量Smad3的陽性表達，兩組比較無差別(P＞0.05)，陽性信號主要位于神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞胞漿和胞核中。在腦缺血再灌注6h組中Smad3的表達有所升高，3d時到達高峰，之后呈逐漸下降趨勢，7d組陽性細胞數(shù)較3d組也有明顯減少，但仍高于假手術(shù)組和正常組。IR組與假手術(shù)組及正常對照組比較Smad3的表達有差

5、異，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);(2)免疫組化檢測正常對照組與假手術(shù)組SD大鼠腦組織中可見少量的Smad7陽性表達，兩組比較無差別(P＞0.05)，陽性信號主要位于神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞胞漿和胞核中。在腦缺血再灌注6h組中Smad7的表達有所升高，3d時到達高峰，之后呈逐漸下降趨勢，7d組陽性細胞數(shù)較3d組也有明顯減少，但仍高于假手術(shù)組和正常組。IR組與假手術(shù)組及正常對照組比較Smad7的表達有差異，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)

6、。(3)免疫組化檢測丹紅藥物干預(yù)組中，Smad3的表達趨勢與IR組基本相同，但陽性細胞數(shù)明顯高于IR組，且其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。而丹紅藥物干預(yù)組與缺血再灌注組中Smad7的表達有所不同。在丹紅藥物干預(yù)6h組中Smad7的表達有所升高，1d時到達高峰，之后呈逐漸下降趨勢，3d組和7d組陽性細胞數(shù)明顯減少，且低于IR組。其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.SD大鼠腦缺血再灌注后腦組織S