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文檔簡介
1、目的:
本實(shí)驗(yàn)研究Ghrelin對慢性心力衰竭(Chronic heart failure,CHF)大鼠心肌組織及血漿中細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1(Apoptosis signal- regulating kinase1,ASK1)表達(dá)的影響,希望進(jìn)一步揭示Ghrelin在CHF病理進(jìn)程中的作用,為更好地預(yù)防和治療CHF提供理論依據(jù)。
方法:
選取健康SD雄性大鼠90只隨機(jī)分為二組,假手術(shù)組(D組)18只、實(shí)驗(yàn)
2、組72只。隨后又將手術(shù)組又分為:模型組(CHF+生理鹽水) A組、治療組(CHF+Ghrelin) B組、拮抗組(CHF+D-LYS3-GHRP-6) C組每組24只。采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立大鼠 CHF模型,假手術(shù)組(D組)只擠出心臟,不結(jié)扎冠狀動脈,隨后在2周、4周、8周分別取材。
?、倮眯碾妶D、心臟彩超監(jiān)測大鼠左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和左心室短軸縮短分?jǐn)?shù)(FS)及大鼠心肌組織切片HE染色等方法來判斷大鼠是否產(chǎn)生CH
3、F;
②電鏡下觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);
?、勖庖呓M織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)的方法,觀測ASK1在大鼠心肌組織中表達(dá)的變化;
?、苊嘎?lián)免疫吸附劑測定(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)檢測大鼠血漿中ASK1含量變化。
結(jié)果:
①在2周、4周、8周時(shí),B組相應(yīng)時(shí)段大鼠較A組和C組相應(yīng)時(shí)段一般狀況明顯改善,但一般狀況略
4、差于D組;C組較 A組一般狀況有明顯加重。
②8周時(shí),B組與A組(p<0.05)和C組(p<0.01)相比EF和FS值明顯增高,但明顯低于D組(p<0.05),C組比A組明顯下降,p<0.01具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
?、跦E染色在2周、4周、8周時(shí)大鼠心肌細(xì)胞A組、C組損傷明顯;D組正常;B組有損傷改變;C組損傷最明顯,8周時(shí)電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)A組、C組損傷明顯;D組正常;B組有損傷改變;C組損傷最明顯。<
5、br> ?、苊庖呓M織化學(xué)方法及酶聯(lián)免疫吸附劑測定檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)在2周、4周、8周時(shí),D組相應(yīng)時(shí)間段ASK1陽性表達(dá)區(qū)面積與總面積之比值分別為0.026、0.029、0.030及血漿中ASK1的含量分別為6.15n g/ml、6.24ng/ml、6.27ng/ml;A組相應(yīng)時(shí)間段ASK1陽性表達(dá)區(qū)面積與總面積之比及血漿中ASK1的含量均高于 B組相應(yīng)時(shí)段(P<0.05)、低于 C組相應(yīng)時(shí)段(P<0.01)、高于D組相應(yīng)時(shí)間段(P<0.05)
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