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1、 目的:系統(tǒng)性硬化癥( systemic scLerosis,SSc)的發(fā)病和肺臟與免疫功能密切相關(guān)。本研究通過(guò)觀察麥門冬湯的治療作用及其對(duì)博來(lái)霉素所致 BALB/C 硬皮病小鼠 CD4+T、CD8+T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的活化等影響;對(duì)抑制膠原產(chǎn)生的細(xì)胞 IL-10、TNF-γ的影響;對(duì)導(dǎo)致成纖維細(xì)胞活化生長(zhǎng)的細(xì)胞因子 TGF-β、CTGF、PDGF、IL-4、IL-6、TNF-α等的影響;對(duì)免疫器官胸腺、脾臟的影響;對(duì)皮膚和肺臟的病理
2、學(xué)改變、皮膚膠原含量、羥脯氨酸檢測(cè)及皮膚和肺組織中 TNF-α、TGF-β、CTGF、PDGF、IL-10 表達(dá)的影響,探討麥門冬湯在治療 SSc 過(guò)程中對(duì)“衛(wèi)氣(免疫功能)”與“肺和皮毛”的作用及其機(jī)理。
方法:硬皮病小鼠模型建立后,隨機(jī)將 60 只小鼠分為模型組、麥門冬高、中、低劑量組,并設(shè)正常對(duì)照組即正常對(duì)照組。治療三周后采集標(biāo)本,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠外周血中 CD+4 T 細(xì)胞、CD+8 T 細(xì)胞的含量;用 ELI
3、SA 法檢測(cè)血清 IL-10、TNF-γ、TGF-β、CTGF、 PDGF、IL-4、IL-6、TNF-α及肺組織中 TNF-α、TGF-β、CTGF、PDGF、IL-10 的含量;用臺(tái)盼藍(lán)染色法計(jì)算小鼠巨噬細(xì)胞的活力;切取小鼠背部注射區(qū)皮膚及肺部組織,切成 2 塊,1 塊固定 10 %甲醛液,石蠟包埋用于蘇木素-伊紅(HE)染色和 Masson 染色,另 1 塊勻漿備用,用以測(cè)定單位皮膚及肺組織中羥脯氨酸的含量;取胸腺、脾臟,計(jì)算其臟
4、器指數(shù);數(shù)據(jù)皆采用 SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件包分別求得各組的數(shù)據(jù)均值和標(biāo)準(zhǔn)差(χ±S ),做 t 檢驗(yàn)。
結(jié)果:( 1)麥門冬湯能降低模型組小鼠的胸腺指數(shù)( P<0.01);提高腹腔巨噬細(xì)胞活力( P<0.01);提高模型組小鼠CD4+T、CD8+T的含量(P<0.01);( 2)麥門冬湯能降低模型組小鼠皮膚厚度、肺纖維化指數(shù)及羥脯氨酸的含量(P<0.01);( 3)麥門冬湯能降低模型組小鼠外周血中IL-10、TNF-
5、γ、TGF-β、CTGF、PDGF、TNF-α、IL-4、IL-6的含量( P<0.01);( 4)麥門冬湯能降低模型組小鼠皮膚中CTGF、PDGF、IL-10、TGF-β、TNF-α的含量( P<0.01);( 5)麥門冬湯能降低模型組小鼠肺中CTGF、PDGF、IL-10、TGF-β、TNF-α的含量(P<0.01)。
結(jié)論:( 1)SSc 的成因中醫(yī)學(xué)認(rèn)為是腠理不密,肺失宣降為內(nèi)因,外邪侵襲是誘發(fā)因素?!靶l(wèi)外不固,肺
6、失宣降”是 SSc 發(fā)生的重要環(huán)節(jié),恢復(fù)衛(wèi)氣及肺的功能發(fā)揮著舉足輕重的作用;通過(guò)該實(shí)驗(yàn)提示治療肺痿的代表方——麥門冬湯可以調(diào)節(jié)小鼠的免疫功能,并對(duì) SSc 具有一定的治療作用。( 2)麥門冬湯對(duì)小鼠 SSc 有良好的治療效果。( 3)麥門冬湯對(duì)小鼠 SSc 具有量效關(guān)系。(4)麥門冬湯治療 SSc 的機(jī)制可能與提高硬皮病模型小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的活力, CD+4T、CD+8T 的含量;降低皮膚的厚度、羥脯氨酸的含量、皮膚和肺臟的纖維化指數(shù)、
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