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文檔簡介
1、目的:研究銅綠假單胞菌在浮游態(tài)、生物膜態(tài)及經(jīng)亞胺培南、環(huán)丙沙星誘導下,外排泵MexAB-OprM及其負性阻遏蛋白MexR表達情況。 方法:用銅綠假單胞菌PAO1在eppendorf管內(nèi)建立生物膜,通過結晶紫快速染色法證實生物膜的形成。用1/2MIC的亞胺培南、環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌浮游菌誘導4小時;4MIC的亞胺培南、2MIC的環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌生物膜菌誘導12小時,分別于生物膜形成的第3天及第5天,用實時熒光定量PCR的方
2、法,測定銅綠假單胞菌外排泵MexAB-OprM及MexR的基因表達。 結果:銅綠假單胞菌由浮游菌變?yōu)樯锬ぞ螅ǖ?天和第5天),其外排泵MexAB-OprM的表達水平明顯降低,其相對表達量最高相差近10倍,其差別存在統(tǒng)計學意義(P<0.05),而生物膜菌第3天和第5天相比,盡管MexAB-OprM相對表達量相差近3倍,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。銅綠假單胞菌由浮游菌變?yōu)樯锬ぞ螅ǖ?天和第5天),阻遏蛋白MexR表達
3、差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。生物膜菌第3天和第5天,其MexAB-OprM和MexR表達差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在亞胺培南及環(huán)丙沙星誘導后,浮游菌和生物膜菌其基因MexAB-OprM、MexR表達差別均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論:銅綠假單胞菌由浮游菌轉變?yōu)樯锬ぞ?,外排泵MexAB-OprM表達明顯減少,MexR基因表達無影響。生物膜菌的第3天與第5天,其MexAB-OprM、MexR基因表達無差別。
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