金屬蛋白酶解離素9在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、胰腺癌是人體常見的惡性腫瘤之一，在中國、日本、西歐各國均為發(fā)病率高的惡性腫瘤，病程短，進展快，早起無明顯或特異的癥狀和體征，臨床診斷時大多屬晚期，具有高度侵襲性，多存在鄰近器官和血行轉移，預后極差，通常一年生存率不到10％，五年生存率不到5％，中位生存率僅為3-4個月.其治療的首選方案為手術，但長期的臨床實踐表明，對于胰腺癌的治療，單純手術的治療效果是有限的，同時由于腫瘤耐藥性的產生，目前常用于胰腺癌的一些化療藥物的治療效果也不佳，單藥

2、化療近期療效低于10％.因此，為了提高胰腺癌患者的總的生存率，現(xiàn)在急切需要研究新的有效的治療方法，比如新的化療藥，介入治療和基因治療，而進一步提高胰腺癌治療效果的關鍵則在于加強基礎研究，對其發(fā)病機理和分子生物學特性的進一步闡明可以進一步推動新型分子水平的靶向治療藥物的發(fā)展和新的治療方案的產生。金屬蛋白酶解離素9是金屬蛋白酶解離素家族中的一員，主要以其金屬蛋白酶活性和與整合素結合的能力廣泛參與人類多種疾病的發(fā)生發(fā)展，尤其是腫瘤性疾病。深入

3、研究ADAM9在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用有助于找到新的靶點，從而為腫瘤治療提供新的方法。
　　 目的：金屬蛋白酶解離素9是金屬蛋白酶解離素家族中的一員，最近研究結果表明ADAM9在乳腺癌、胃癌，大腸癌肝癌、黑色素瘤、非小細胞性肺癌、前列腺癌等組織和細胞中高表達，能提高腫瘤細胞的侵襲與轉移的能力，和腫瘤發(fā)生，侵襲，轉移有關。因此，本實驗的目的就是研究ADAM9在胰腺癌細胞中的作用，以期為胰腺癌治療尋找新的靶點。
　　 方法：篩

4、選ADAM9高表達胰腺癌細胞系，應用ADAM9 siRNA阻斷ADAM9蛋白表達，Westem Blotting檢測其干擾效應，MTT實驗檢測細胞增殖能力變化，transwell體外遷移實驗測定細胞遷移性交化，transwell體外侵襲實驗檢測細胞侵襲性變化，體外3D細胞培養(yǎng)實驗檢測細胞集落形成能力變化情況。
　　 使用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析，實驗數據以x±s表示，數據錄入SPSS16.0完成統(tǒng)計分析，對所有計量資料均

5、先進行單樣本K-S正態(tài)分布檢驗，屬正態(tài)分布進行t檢驗，如屬于非正態(tài)分布進行非參數檢驗(秩和檢驗).P<0.05有統(tǒng)計學差異，P<0.01有顯著統(tǒng)計學差異，
　　 結果：RT-PCR結果顯示三種胰腺癌細胞系中，PANC-1細胞系較其他兩種細胞系高表達ADAM9基因；Western Blotting結果顯示ADAM9 siRNA處理后，pro-ADAM9-L和ADAM9-L蛋白表達幾乎檢測不到，ADAM9-S蛋白也明顯減少；MTT結

6、果顯示ADAM9 siRNA處理后，ADAM9 siRNA處理組胰腺癌細胞的增殖受到一定程度的抑制；Transwell小室侵襲實驗和遷移實驗顯示ADAM9蛋白表達抑制后胰腺癌細胞的侵襲能力和遷移能力受到明顯抑制；細胞3D培養(yǎng)實驗顯示ADAM9 siRNA處理組胰腺癌細胞的集落形成能力顯著降低，
　　 結論：本實驗以人胰腺癌PANC-1細胞系為對象，研究ADAM9基因在胰腺癌細胞增殖、侵襲、遷移和集落形成能力方面的作用，研究結果表