“解毒活血方”對(duì)萎縮性胃炎大鼠胃動(dòng)素和胃泌素含量的影響.pdf

1、目的：萎縮性胃炎（AG）是消化系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病。近年來許多學(xué)者對(duì)該病進(jìn)行了諸多研究和探討，對(duì)萎縮性胃炎的診斷與治療做出了巨大貢獻(xiàn)。但本病尚缺乏療效確切、副作用小的西藥，而中醫(yī)藥辨證治療本病具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。解毒活血方由蒲公英、黃連、延胡索、當(dāng)歸、丹參等組成，為導(dǎo)師課題組成員創(chuàng)制的治療萎縮性胃炎的方藥，具有解毒活血，理氣止痛的功效。該方經(jīng)臨床應(yīng)用后，取得了顯著療效。本研究采用N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍（MNNG）法合并水楊酸鈉法、

2、熱鹽水法、饑飽失常法四因素法復(fù)制萎縮性胃炎大鼠模型。選用維霉素、三九胃泰及解毒活血方進(jìn)行預(yù)防和治療給藥。通過觀察各組大鼠胃黏膜病理形態(tài)、血漿胃動(dòng)素（MTL）、血清胃泌素（GAS）的變化，從而探討該方治療萎縮性胃炎的作用機(jī)制。
　　 方法：健康wistar大鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組：正常組、模型組、解毒活血方治療組、三九胃泰對(duì)照組、維酶素對(duì)照組，每組14只。正常組大鼠每天喂基礎(chǔ)飼料，自由飲水，以蒸餾水2ml/只/天灌胃；其

3、它組大鼠基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)2天，停食1天（饑飽失常法），自由飲用濃度為160μg/ml的MNNG溶液，并用2％的水楊酸鈉溶液和15％的NaCl溶液（加熱至55℃）隔日交替灌胃，制作萎縮性胃炎大鼠模型。同時(shí)，解毒活血方組以51.7g生藥/kg體重灌胃，每日1次；三九胃泰對(duì)照組以10g生藥/kg體重灌胃，每日1次；維酶素對(duì)照組以0.99g生藥/kg體重灌胃，每日1次。各組灌胃前后均禁食2小時(shí)。每天觀察大鼠的一般情況。12周末隨機(jī)抽取正常組和模型組

4、大鼠各2只（雌雄各1只）處死，剖腹、取胃，在胃竇和胃體部各取一塊組織，用10％福爾馬林固定做光鏡觀察。光鏡觀察發(fā)現(xiàn)大鼠胃黏膜腺體萎縮，完成造模。
　　 最后一次灌胃后，禁食（不禁水）24小時(shí)，斷頭取靜脈血5ml，置于含7.5％EDTA二鈉30μl和抑肽酶40μl的試管中混勻，4℃3000rpm離心10min，分離血漿，MTT待測(cè)；斷頭取靜脈血5ml，4℃，3000rpm離心10min，分離血清，GAS待測(cè)。無菌操作剖腹取胃，沿胃

5、大彎剪開，用冰生理鹽水漂沈胃內(nèi)容物，濾紙吸干，先肉眼觀察胃黏膜的大體形態(tài)，再剪取胃竇部組織2塊，每塊約1mm3，4％多聚甲醛固定，逐級(jí)酒精脫水，常規(guī)石蠟包埋，切片，用HE染色，光鏡下觀察胃黏膜病理形態(tài)學(xué)變化。全部數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。各組均數(shù)的比較采用單因素方差分析，顯著性差異水平以0.05、0.01為標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1、各組大鼠的一般情況
　　 正常組大

6、鼠精神好，行動(dòng)敏捷，被毛光澤貼身，食量較大且穩(wěn)定，大便顆粒狀，尾色淡紅。模型組大鼠精神狀態(tài)差，萎靡不振，易受驚嚇，行動(dòng)遲緩，喜歡蜷縮聚堆生活，食欲不振，進(jìn)食量明顯減少，大便溏瀉，皮毛雜亂無光澤，耳朵尾巴顏色深紅發(fā)紫，體型較瘦弱。其他三組給藥治療后，一般情況明顯好轉(zhuǎn)，活動(dòng)、攝食、毛發(fā)、大便性狀、尾色等伴隨給藥時(shí)間增加而改善，尤其是解毒活血方治療組的大鼠食量明顯多于其余四組。實(shí)驗(yàn)期間，解毒活血方組、三九胃泰組和維霉素組分別死亡大鼠2只，死亡

7、原因可能是灌胃及藥物提純等原因。
　　 2、解毒活血方對(duì)萎縮性胃炎大鼠胃黏膜病理形態(tài)學(xué)的影響
　　 2.1大體觀察
　　 正常組大鼠胃黏膜呈粉紅色，有光澤，被覆較多黏液，黏膜皺襞表面光滑，走形規(guī)則，胃壁彈性良好。模型組大鼠胃黏膜色澤蒼白，黏膜變薄，并可見黏膜下血管顯露，皺襞平坦或走形紊亂，胃壁彈性減弱。三九胃泰對(duì)照組及維霉素對(duì)照組亦有不同程度的胃黏膜色澤蒼白，黏膜變薄，胃壁彈性減弱的表現(xiàn)，但優(yōu)于模型組。解毒活血方

8、組大鼠胃黏膜肉眼觀察與正常對(duì)照組無明顯差別，顯著優(yōu)于各對(duì)照組。
　　 2.2光學(xué)顯微鏡觀察（HE染色）
　　 光學(xué)顯微鏡觀察，正常組胃黏膜上皮完整、腺體排列規(guī)則，黏膜肌層較薄。模型組上皮不完整，黏膜變薄，多數(shù)腺體結(jié)構(gòu)排列紊亂，黏膜腺體有不同程度的萎縮或消失，黏膜肌層增厚，并向固有層延伸。解毒活血方組胃黏膜上皮相對(duì)完整，黏膜厚度均勻，腺體排列較規(guī)整。三九胃泰組肌層相對(duì)較薄，萎縮的腺體較少。維霉素組肌層明顯增厚，腺體萎縮較多

9、。
　　 3、解毒活血方對(duì)萎縮性胃炎大鼠血漿胃動(dòng)素含量的影響
　　 與正常組比較，模型組大鼠血漿MTL含量明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與模型組比較，解毒活血方組、三九胃泰組及維酶素組MTL含量均明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；解毒活血方組與三九胃泰組比較MTL含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；解毒活血方組與維酶素組比較MTL含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　

10、4、解毒活血方對(duì)萎縮性胃炎大鼠血清胃泌素含量的影響
　　 與正常組比較，模型組大鼠血清GAS量明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與模型組比較，解毒活血方組、三九胃泰組及維酶素組GAS含量均明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；解毒活血方組與三九胃泰組比較GAS含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；解毒活血方組與維酶素組比較GAS含量明顯升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　 結(jié)論：