2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、卒中是世界第二大死因,在發(fā)達國家是喪失勞力修正壽命年的第二大原因,在我國女性死因中列第二位,男性死因中列第三位。缺血性卒中約占卒中的80%,其早期治療主要有兩種途徑:血管再通和神經(jīng)保護治療。使用tPA溶栓治療受限于其過窄的時間窗和對出血等并發(fā)癥的擔(dān)心,尚不能廣泛應(yīng)用。神經(jīng)保護的目標(biāo)是挽救缺血半暗帶尚具活力的腦組織,雖然很多神經(jīng)保護藥物未能在臨床試驗中證實其有效性,但其仍是卒中早期治療研究中的熱點,極具挑戰(zhàn)性。
  人參皂甙Rd(G

2、SRd)是人參皂甙的主要活性成分之一,在三七中的含量高達4.07%,實際應(yīng)用經(jīng)濟。近來研究表明GSRd能夠拮抗Ca2+通道,對紅藻氨酸和氧化損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有保護作用。本實驗使用海馬神經(jīng)元氧糖剝奪(OGD)模型和大鼠大腦中動脈阻塞(MCAO)模型,探討了GSRd的神經(jīng)保護作用和可能的作用機制。
  1.體外實驗
  目的研究GSRd對海馬神經(jīng)元OGD損傷模型的保護作用和可能的作用機制。方法細(xì)胞取材自孕18天胎鼠,以B27/

3、Neurobasal培養(yǎng)基培養(yǎng)神經(jīng)元。體外培養(yǎng)至第6-8天進行OGD實驗。OGD持續(xù)2h,之后復(fù)糖復(fù)氧24h。一組實驗中GSRd在OGD前及OGD結(jié)束復(fù)氧開始時兩次給藥,另一組實驗研究GSRd延后治療的效果,僅在OGD結(jié)束,復(fù)氧開始時給藥。24h后使用LDH法和Hoechst33342/PI雙重染色法來評定細(xì)胞活力。用熒光染料DCFH-DA來顯示活性氧簇(ROS),用羅丹明123來顯示線粒體膜電位(MMP)。熒光強度用流式細(xì)胞儀來測定。

4、細(xì)胞丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性用試劑盒以分光光度法來測量。我們還研究了GSRd對抗谷氨酸興奮性毒性的保護作用。結(jié)果PI吸收法顯示2h的OGD能夠造成約50%的細(xì)胞壞死,GSRd(0.1-10μM)能夠顯著的降低壞死細(xì)胞數(shù)量。LDH法也得出相似的趨勢。相反地,GSRd延后給藥未能顯示出顯著的保護作用。OGD后,ROS增加到基線的2.08倍,GSRd能夠顯著的降低ROS的蓄積,降低MDA水平,提高SOD活性。OGD導(dǎo)

5、致線粒體去極化,表現(xiàn)為羅丹明123的熒光強度降為基線的40.3%,GSRd能夠穩(wěn)定MMP。在興奮性毒性的模型上,谷氨酸導(dǎo)致大量LDH漏出,顯示明顯的細(xì)胞損傷。戲劇性地,GSRd幾乎能夠完全消除這一損傷作用。結(jié)論GSRd在培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元上對OGD損傷具有保護作用,這可能與其能夠抑制氧化應(yīng)激損傷,保持MMP和對抗谷氨酸毒性作用有關(guān)。
  2.在體實驗
  目的在局灶性腦缺血大鼠模型上進一步探討GSRd的神經(jīng)保護作用。方法用線栓

6、法來制備局灶性腦缺血模型,缺血持續(xù)2h,再灌注同時給予GSRd或溶劑(生理鹽水)對照給予治療。24h后進行神經(jīng)功能缺損檢查并且用TTC染色法評估腦梗死體積。結(jié)果再灌注24h后,與溶劑治療組相比,GSRd治療組的動物在神經(jīng)行為學(xué)上顯示出明顯的改善(GSRd10mg/Kg,P=0.012;GSRd30mg/Kg,P=0.002)。溶劑治療組動物的平均腦梗死體積為232.7mm3。GSRd治療能夠顯著的降低梗死體積(10mg/Kg,189.2

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