GAS對(duì)PQ和MB誘導(dǎo)小鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease, PD)是中老年常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,在我國(guó)其發(fā)病率在65 歲以上人群高達(dá)1.6％。其病理特征是中腦黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)多巴胺(Dopamine，DA)能神經(jīng)元變性死亡，當(dāng)DA 能神經(jīng)元死亡超過(guò)50％時(shí)，導(dǎo)致腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)DA 明顯減少，出現(xiàn)靜止性震顫、肌強(qiáng)直和運(yùn)動(dòng)遲緩等臨床表現(xiàn)。目前認(rèn)為PD的發(fā)病是由遺傳、環(huán)境及老齡等因素共同作用的結(jié)果。 除草劑百草枯(1,1’-二甲基-4,4’-聯(lián)

2、吡啶陽(yáng)離子，Paraquat, PQ)的大量應(yīng)用是PD發(fā)病率增高最重要的環(huán)境危險(xiǎn)因素之一，PQ目前在我國(guó)使用非常廣泛, 它與已知嗜神經(jīng)毒1- 甲基-4- 苯基-1,2,3,6- 四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP) 的活性代謝產(chǎn)物1-甲基-4-苯基-吡啶(1-methyl-4-pheny1-pyridium, MPP+) 的化學(xué)結(jié)構(gòu)極其相似，其致病機(jī)制也有類(lèi)似之

3、處。大量流行病學(xué)研究顯示長(zhǎng)期接觸PQ明顯增加了PD的發(fā)病危險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，PQ可選擇性引起多巴胺(Dopamine,DA)能神經(jīng)元損傷，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)類(lèi)似PD的癥狀。代森錳(Maneb, MB)與PQ 有重疊的作用區(qū)域, 已顯示有減低運(yùn)動(dòng)功能和潛在MPTP 作用，同時(shí)暴露于PQ和MB 對(duì)DA能系統(tǒng)產(chǎn)生的毒害作用比單獨(dú)暴露于其中任何一種物質(zhì)要大。天麻素(Gastrodin, GAS)是一種良好的神經(jīng)保護(hù)劑，研究證實(shí)它對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病老年性

4、癡呆(Alzheimer's disease, AD)具有較好治療作用，而PD與AD均屬于老年神經(jīng)退行性疾病，兩者發(fā)病機(jī)制有很多類(lèi)似之處。 那么，GAS 對(duì)PQ 和MB 誘導(dǎo)的DA 能神經(jīng)元損傷是否具有保護(hù)作用？目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究擬采用GAS 對(duì)PQ 和MB 誘導(dǎo)小鼠黑質(zhì)DA 能神經(jīng)元損傷施加干預(yù)，旨在證實(shí)GAS 對(duì)PQ 和MB 所致DA 能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用，并從氧化應(yīng)激方面揭示其可能的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下：

5、目的：探究GAS對(duì)PQ和MB誘導(dǎo)的DA能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法：用PQ和MB建立C57BL小鼠PD模型，設(shè)立空白組、模型組、GAS低劑量組、GAS中劑量組、GAS高劑量組5組，每組8只，在應(yīng)用PQ及MB前或后給予GAS干預(yù)，通過(guò)一般行為學(xué)觀(guān)察、爬桿實(shí)驗(yàn)(pole test) 、懸掛實(shí)驗(yàn)(traction test) 和游泳實(shí)驗(yàn)(swimming test) 以檢測(cè)其肢體運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)情況及免疫組織化學(xué)染色觀(guān)察TH陽(yáng)性細(xì)胞

6、的數(shù)量；每組取7只小鼠，斷頭取腦，分離出雙側(cè)黑質(zhì)，制成10％的組織勻漿，測(cè)定MDA、GSH-Px、GSH、SOD的含量。 結(jié)果：小鼠注射PQ和MB后出現(xiàn)震顫、豎尾、豎毛、運(yùn)動(dòng)遲緩、步態(tài)不穩(wěn)、肢體僵硬，活動(dòng)明顯減少，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)提示肢體協(xié)調(diào)也明顯減弱，同時(shí)中腦黑質(zhì)致密部(SNc)的TH陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少；GAS低、中、高劑量組癥狀較模型組輕，肢體運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性明顯增強(qiáng)(P<0.05)，TH陽(yáng)性細(xì)胞均較模型組明顯增加(P<0.05)。GAS

7、低、中、高劑量組MDA含量(分別為6.5±2.7 nmol/mg、6.2±2.3 nmol/mg、5.3±1.6 nmol/mg)與模型組MDA含量為9.7±3.1 nmol/mg相比較明顯降低(P<0.05)，GAS低、中、高劑量組GSH-Px、GSH、SOD的含量(GSH-Px的含量分別為3.1±0.3 nU/g 、3.5±0.5 nU/g、3.9±0.4 nU/g；GSH的含量分別為6.1±2.1 mg/g、6.5±1.9 mg/

8、g、6.8±1.7 mg/g；SOD的含量分別為160.3±7.3 nU/mg、164.5±10.2 nU/mg、182±9.7 nU/mg)與模型組GSH-Px、GSH、SOD的含量(2.5±0.4 nU/g、4.4±1.5mg/g、138.5±6.4 nU/mg)相比較明顯增高(P<0.05)。 結(jié)論：GAS對(duì)PQ和MB誘導(dǎo)的DA能神經(jīng)元損傷具有一定的保護(hù)作用。GAS可增加腦內(nèi)GSH-Px、GSH、SOD含量，降低MDA含量