美滿霉素對多巴胺能神經元保護機制的實驗研究.pdf

1、華中科技大學博士學位論文美滿霉素對多巴胺能神經元保護機制的實驗研究姓名：沈偉申請學位級別：博士專業(yè)：神經病學指導教師：孫圣剛20060401華中科技大學同濟醫(yī)學院2003級博士學位論文第二部分美滿霉素抑制脂多糖誘導的小膠質細胞腫瘤壞死因子Q的表達目的在離體細胞培養(yǎng)中，探討MC對LPS誘導的BV一2細胞腫瘤壞死因子一a(TumornecrosiSfactor—o，TNF—a)表達的影響。方法將MC或LPS加入培養(yǎng)的BV一2細胞中，使用酶聯(lián)

2、免疫吸附試驗(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)、免疫組織化學方法觀察BV一2細胞中TNF—o蛋白的表達，逆轉錄聚合酶鏈式反應檢測細胞TNF—omRNA表達。結果LPS(100ng／m1)組BV2細胞培養(yǎng)上清中的TNF一Ⅱ含量顯著升高(P(O01)、細胞中TNF—Q蛋白和mRNA的表達也顯著升高(均P(O01)，高于空白對照組。MC(10肚mol／L)預處理可明顯抑制上述變化。MCLPS組BV一2

3、細胞培養(yǎng)上清中TNF—o含量較LPS組顯著下降(PO05)。MCLPS組BV一2細胞中TNF—a蛋白、mRNA的表達較LPS組顯著下降(均P(O01)，但仍顯著高于空白對照組(均P(O05)。結論MC預處理可顯著抑制LPS誘導的小膠質細胞TNF—n的表達。聯(lián)鍵詞1美滿霉茲叫‘2≯朋旨擘刊、膠紫脅腫瘤壞死因子。。第三部分美滿霉素下調P38MAPK的表達抑制脂多糖誘導的小膠質細胞的活化目的在離體細胞培養(yǎng)中，探討Mc抑制LPS誘導的BV一2細

4、胞活化與P38MAPK信號傳導途徑的關系。方法將MC或LP$加入培養(yǎng)的BV一2細胞中，利用Western免疫印跡法觀察BV2細胞P38絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen—activatedproteinkinase，P38MAPK)表達的變化。結果實驗各組BV一2細胞P38MAPK總蛋白水平無變化；空白對照組、MC組幾乎無磷酸化P38MAPK(PPMAPK)蛋白的表達；LPS組pPMAPK蛋白表達水平顯著上調，與空白對照組有顯著差異(P