骨炎寧顆粒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、骨炎寧顆粒是老中醫(yī)李同生教授祖?zhèn)鹘?jīng)驗(yàn)方，由金銀花、赤芍、大血藤、天花粉、皂角刺，地榆等十味中藥制備的純中藥復(fù)方制劑，具有解熱止痛、活血消腫的功效。臨床用于急慢性化膿性骨髓炎，關(guān)節(jié)炎，膿腫疔痛等。幾十年來(lái)作為醫(yī)院制劑在我院臨床應(yīng)用，由于具有明顯療效，深受病患者歡迎。本課題對(duì)骨炎寧顆粒的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、主要藥效學(xué)進(jìn)行了研究，從而為該藥開(kāi)發(fā)成三類(lèi)國(guó)家新藥奠定了基礎(chǔ)。 采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取工藝，采用L<,9>(3<'4>)正交試驗(yàn)

2、表，選擇可能影響提取效果煎煮次數(shù)(A)、加水量(B)、浸泡時(shí)間(C)、煎煮時(shí)間(D)4 個(gè)因素進(jìn)行試驗(yàn)，以綠原酸收率和出膏率為檢測(cè)指標(biāo)，綜合得分=(綠原酸含量/最大值×0.5+出膏率/最大值×0.5)×100％，計(jì)算綜合得分。從直觀分析，各因素的影響作用主次：為A>D>C>B；各因素不同水平的排序?yàn)椋篈<,2>>A<,3>>A<,1>，B<,1>>B<,3>>B<,2>，C<,2>>C<,3>>C<,1>，D<,3>>D<,2>>D<,

3、1>。確定最佳水煎煮提取工藝為8倍水浸泡40min后，煎煮二次，每次60min，按照上述擬定工藝進(jìn)行水煎提取試驗(yàn)，結(jié)果干膏得率13.60％，綠原酸的提取率為 80.60％；用正交試驗(yàn)篩選噴霧干燥工藝條件，采用L<,9>(3<'4>)正交試驗(yàn)表，選擇可能影響干燥效果浸膏濃度(A)、進(jìn)風(fēng)溫度(B)、出風(fēng)溫度(C)3個(gè)因素進(jìn)行試驗(yàn)。以綠原酸收率和含水率為檢測(cè)指標(biāo)，各因素對(duì)綠原酸含量影響大小順序?yàn)锳>C>B，但浸膏相對(duì)密度影響非常顯著，出口溫度

4、影響顯著，進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)噴霧干燥時(shí)的綠原酸含量無(wú)明顯影響。水分各個(gè)因素的影響依次為A>B>C，浸膏相對(duì)密度、進(jìn)風(fēng)溫度兩因素影響非常顯著，出口溫度影響顯著，考慮到噴霧粉的水分指標(biāo)都在合格范圍內(nèi)，初步確定最佳工藝為A<,3>B<,3>C<,1>，確定最佳噴霧干燥工藝為浸膏相對(duì)密度1.3、進(jìn)風(fēng)溫度110℃、出口溫度40℃。按照上述擬定工藝進(jìn)行噴霧干燥試驗(yàn)，結(jié)果水分率4.5％，綠原酸的提取率為 79.40％；放大驗(yàn)證結(jié)果表明，按優(yōu)選的提取、干燥工藝

5、制備的顆粒，其干膏收率、干浸膏中綠原酸的含量與正交試驗(yàn)的工藝驗(yàn)證結(jié)果基本一致，綠原酸的轉(zhuǎn)移率也可以接受，說(shuō)明本提取工藝基本可行；通過(guò)薄層色譜法對(duì)骨炎寧顆粒中的大血藤、天花粉、皂角刺和地榆進(jìn)行了定性的分析研究，結(jié)果表明，供試品色譜中，在與對(duì)照品(或?qū)φ账幉?色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照樣品則無(wú)此斑點(diǎn)，定性鑒別專(zhuān)屬性強(qiáng)；通過(guò)高效液相色譜法，建立了綠原酸的含量測(cè)定方法，HPLC 法測(cè)定樣品中綠原酸含量的色譜條件：以十八烷基硅烷

6、鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-O.4％磷酸水溶液(9：91)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm，理論板數(shù)按綠原酸計(jì)算應(yīng)不低于5000，結(jié)果表明：骨炎寧顆粒中綠原酸與其它組分良好分離，綠原酸濃度線性范圍在0.0025～0.04μg，r=0.9999，樣品加樣回收率為99.60％(n=6)， RSD=1.07％(n=6)；通過(guò)高效液相色譜法，建立了芍藥苷的含量測(cè)定方法，HPLC 法測(cè)定樣品中芍藥苷含量的色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙

7、腈-水(13：87)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為 230nm，理論板數(shù)按芍藥苷計(jì)算應(yīng)不低于 5000，結(jié)果表明骨炎寧顆粒中芍藥苷與其它組分良好分離，芍藥苷濃度線性范圍在0.06～0.96μg，r=0.99996樣品加樣回收率為98.5％(n=6)， RSD=1.61％(n=6)；結(jié)果表明，定量分析重現(xiàn)性良好，方法可靠性強(qiáng)；通過(guò)加速試驗(yàn)和正常室溫條件放置考察骨炎寧顆粒的穩(wěn)定性，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，說(shuō)明該制劑的穩(wěn)定性好。初步藥理學(xué)研究表明骨炎寧顆