短管兔耳草正丁醇提取物抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)活性的研究.pdf

1、目的：短管兔耳草是傳統(tǒng)藏醫(yī)中經(jīng)常使用的一味藏藥。本試驗(yàn)用短管兔耳草正丁醇提取物，研究其誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的活性；探討其對(duì)荷S180肉瘤小鼠的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用，為這一珍貴植物資源的開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。 方法：將SGC-7901細(xì)胞與不同濃度的短管兔耳草正丁醇提取物共同培育，用MTT比色法檢測(cè)藥物對(duì)該細(xì)胞株增殖的抑制作用；用熒光顯微鏡、透射電鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化并照相；用瓊脂糖電泳法檢測(cè)細(xì)胞凋亡過(guò)程中DNA碎片

2、的形成；用流式細(xì)胞分析儀測(cè)定細(xì)胞的凋亡率。制備荷S180肉瘤的小鼠模型，將小鼠分為生理鹽水陰性對(duì)照組、環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組、短管兔耳草正丁醇提取物實(shí)驗(yàn)組(500～1500mg/Kg·d，連續(xù)灌胃給藥7天)，同時(shí)建立空白對(duì)照組(不接種腫瘤，每日用0.9％生理鹽水灌胃)。分離腫瘤組織稱(chēng)重并計(jì)算抑瘤率；用MTT比色法測(cè)定荷S180肉瘤小鼠T淋巴細(xì)胞的增殖作用；放射免疫法測(cè)定小鼠血清中IL-2、TNF-a的含量；血凝實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠血清中抗綿羊紅細(xì)胞

3、抗體的凝集效價(jià)。 結(jié)果：1.短管兔耳草正丁醇提取物在0.34～21.60mg/ml的范圍內(nèi)對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞株的增殖有明顯的抑制作用，且抑制作用隨藥物濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)(P＜0.01orP＜0.05)。 2.短管兔耳草正丁醇提取物1.35～2.7mg/ml與SGC-7901細(xì)胞株共同培養(yǎng)48小時(shí)后，觀察到細(xì)胞凋亡的形態(tài)特征；流式細(xì)胞儀通過(guò)對(duì)單個(gè)細(xì)胞性狀的快速測(cè)定，在DNA染色后，形成一個(gè)DNA含量＜

4、2n(即＜G1期細(xì)胞)的分布區(qū)，即“亞G1峰”；在瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳，出現(xiàn)明顯的具有生化特征的“DNALadder”。 3.短管兔耳草正丁醇提取物在1000mg/Kg·d及1500mg/Kg·d的濃度時(shí)，對(duì)荷S180肉瘤小鼠的腫瘤組織有顯著抑制作用(p＜0.01)，抑瘤率分別為37％、48％。 4.短管兔耳草正丁醇提取物在PHA的刺激下能增強(qiáng)荷S180肉瘤小鼠T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力(P＜0.05)。 5.短管兔

5、耳草正丁醇提取物在1000～1500mg/Kg·d濃度時(shí)，增加了荷S180肉瘤小鼠血液中IL-2及TNF-a的含量(P＜0.05)。 6.短管兔耳草正丁醇提取物在1000～1500mg/Kg·d濃度時(shí)，增加了小鼠血清中抗綿羊紅細(xì)胞抗體的含量(P＜0.05)。 結(jié)論：1.短管兔耳草正丁醇提取物在體外對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞株的增殖有明顯抑制作用，能夠誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞系的凋亡。 2.短管兔耳草正丁醇提取