復(fù)方菝葜顆粒對(duì)NSCLC A549細(xì)胞p53mRNA及細(xì)胞周期、凋亡率影響的研究.pdf

1、目的：通過含藥血清實(shí)驗(yàn)，研究復(fù)方菝葜顆粒對(duì)肺癌NSCLC A549細(xì)胞P53mRNA及細(xì)胞周期、凋亡率的影響，探討復(fù)方菝葜顆粒治療肺癌的部分作用機(jī)制。 方法： 1．分組：將NSCLC A549細(xì)胞隨機(jī)分為中藥實(shí)驗(yàn)組、西藥對(duì)照組和正常對(duì)照組。中藥實(shí)驗(yàn)組用10％的含藥血清培養(yǎng)肺癌細(xì)胞；西藥對(duì)照組用3μg／ml的順鉑培養(yǎng)；正常對(duì)照組用10％的正常大鼠血清培養(yǎng)。 2．實(shí)驗(yàn)部分：①大鼠血清提?。盒坌許D大鼠30只隨機(jī)分為藥

2、物血清組(中藥組)、正常血清組(對(duì)照組)，每組15只。中藥組予以復(fù)方菝葜顆粒喂服，對(duì)照組給予相同劑量的蒸餾水。給藥6次，末次給藥后2h無菌條件下自左心室取得中藥組血清及對(duì)照組血清，滅活、除菌。②細(xì)胞培養(yǎng)：分別在細(xì)胞培養(yǎng)的Oh，24h，48h和72h進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，繪制細(xì)胞生長曲線，觀察各組細(xì)胞生長狀況。③流式細(xì)胞技術(shù)和RT-PCR檢測：細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后制成單細(xì)胞懸液，流式細(xì)胞技術(shù)檢測NSCLC細(xì)胞的細(xì)胞周期及凋亡率；半定量RT-PCR檢

3、測細(xì)胞中抑癌基因P53mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1．細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)后，中藥實(shí)驗(yàn)組、西藥對(duì)照組和正常對(duì)照組三組的細(xì)胞數(shù)無明顯差異。培養(yǎng)48h后，三組細(xì)胞數(shù)均有所增加，中藥實(shí)驗(yàn)組和西藥對(duì)照組兩組細(xì)胞數(shù)比較無明顯差異；但明顯少于正常對(duì)照組，與之相比有顯著性差異。 2．培養(yǎng)48小時(shí)后，中藥實(shí)驗(yàn)組和西藥對(duì)照組G<,1>細(xì)胞數(shù)、凋亡率明顯高于正常對(duì)照組相，與之相比有顯著性差異。中藥實(shí)驗(yàn)組與西藥對(duì)照組各期細(xì)胞數(shù)、凋亡率無明顯