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文檔簡介
1、[目的]:研究清道夫受體CD36在高脂飲食糖尿病大鼠和2型糖尿病患者中的表達及其可能的機制,觀察噻唑烷二酮類藥物---羅格列酮的干預(yù)作用。 [方法]: SD大鼠高脂飼料喂養(yǎng)4周后,一次性腹腔注射鏈脲佐菌素35mg/kg體重制備2型糖尿病大鼠模型。采用流式細胞術(shù)測定高脂飲食糖尿病大鼠和2型糖尿病患者外周血單核細胞CD36表達的平均熒光強度(MFI),實時定量逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測定高脂飲食糖尿病大鼠骨骼肌、皮下脂
2、肪、附睪脂肪組織中CD36mRNA、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)mRNA和葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)mRNA的表達,Westen blot法測定高脂飲食糖尿病大鼠骨骼肌、皮下脂肪、附睪脂肪組織中CD36蛋白質(zhì)、PPARγ蛋白質(zhì)和GLUT4蛋白質(zhì)的表達;并觀察羅格列酮干預(yù)治療后上述表達的變化。分析CD36的表達與PPARγ、GLUT4的表達及其它細胞因子、代謝指標間的關(guān)系。 [結(jié)果]: (1)高脂飲食一次
3、性腹腔注射鏈脲佐菌素SD大鼠出現(xiàn)明顯的高血糖、高胰島素血癥、脂代謝紊亂和體重增加,與人類2型糖尿病代謝紊亂極為相似。 (2)與正常飲食對照組比較,高脂飲食糖尿病大鼠外周血單核細胞CD36表達的MFI明顯升高(P<0.01);羅格列酮干預(yù)后糖尿病大鼠外周血單核細胞CD36表達的MFI與糖尿病組、干預(yù)前相比均顯著降低(P<0.01);高脂飲食糖尿病大鼠外周血單核細胞CD36表達的MFI與空腹血糖(FBG)、穩(wěn)態(tài)模型評估胰島素抵抗指數(shù)
4、(HOMA-IR)呈正相關(guān)。 (3)與正常飲食對照組比較,高脂飲食糖尿病大鼠骨骼肌、皮下脂肪、附睪脂肪組織中CD36mRNA、PPARγmRNA和蛋白質(zhì)的表達均顯著升高(P<0.01),上述組織中GLUT4 mRNA和蛋白質(zhì)的表達顯著降低(P<0.01):CD36mRNA及其蛋白質(zhì)的表達與PPARγ mRNA及其蛋白質(zhì)的表達變化相一致;與高脂飲食糖尿病大鼠比較,羅格列酮干預(yù)組糖尿病大鼠骨骼肌組織中CD36、PPARγmRNA及其
5、蛋白質(zhì)的表達均明顯下降(P<0.05)、GLUT4mRNA及其蛋白質(zhì)的表達明顯上升(P<0.01),皮下脂肪和附睪脂肪組織CD36、PPARγ和GLUT4 mRNA及其蛋白質(zhì)的表達均升高,但僅在附睪脂肪組織的變化有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 (4)2型糖尿病患者外周血單核細胞CD36表達的MFI較正常對照者明顯增高(P<0.01),伴有動脈粥樣硬化的患者明顯高于無動脈粥樣硬化患者(P<0.01),單核細胞CD36表達的MFI與
6、糖尿病病程、FBG、HbAlc、HOMA-IR呈正相關(guān)。 (5)與對照組以及治療前比較,2型糖尿病患者羅格列酮治療后單核細胞CD36表達的MFI顯著下降(P<0.01),血清可溶性血管細胞粘附分子-1(sVCAM-1)、腫瘤壞死因子α(TNFα)水平明顯降低(P<0.01),血清脂聯(lián)素水平明顯升高(P<0.01);單核細胞CD36表達的MFI與血清sVCAM-1、TNFα水平呈正相關(guān)、與血清脂聯(lián)素水平呈負相關(guān)。 [結(jié)論]
7、:高脂飲食、一次性腹腔注射鏈脲佐菌素SD大鼠是比較理想的2型糖尿病動物模型;2型糖尿病狀態(tài)下外周血單核細胞CD36表達增加,可能是促進糖尿病動脈粥樣硬化的機制之一,高血糖、胰島素抵抗是單核細胞CD36表達的主要上調(diào)因子;羅格列酮能降低2型糖尿病外周血單核細胞CD36表達,其機制可能在于降低血糖、減輕氧化應(yīng)激、改善胰島素抵抗和減輕炎癥反應(yīng);CD36在糖尿病大鼠骨骼肌、脂肪組織的表達受PPARγ的調(diào)節(jié)并具有組織特異性;皮下脂肪和附睪脂肪組織
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