通光藤抗癌活性物質基礎及其制劑研究.pdf

1、以通光藤[蘿蘼科牛奶菜屬植物通光散(Marsdenia tenacissima Robx．Wight et Arn)的干燥藤]為原料生產的“消癌平片”在臨床用于治療癌癥具有確切療效。但國內外文獻對通光藤成分的研究報道較為少見且不深入，僅稱其含有多種皂苷、生物堿、有機酸、多糖、樹脂及色素等多種化學成分；未見針對其抗癌活性成分的研究報道。通光藤的基源復雜、同名異物現(xiàn)象嚴重，國內以通光藤為原料制成的水針劑以綠原酸為其含量測定的指標成分，明顯不

2、足以保證其在臨床應用時的安全、有效和質量穩(wěn)定。為了深入地探索通光藤的抗癌活性物質基礎、作用機理，開發(fā)出安全、有效、質量可控的現(xiàn)代中藥制劑，本文進行了如下研究： 1．本文通過本草考證和試驗研究，總結了不同地方、不同的民族和不同的文獻書籍采用的各種異名、地方名和別名，發(fā)現(xiàn)云南的“通光藤”和四川的“奶漿藤”均為同一生藥，彼此為同物異名；而云南的“通光藤”的別名“烏骨藤”與貴州的“烏骨藤”為同名異物；首次報道了四川有植物通光散的分布，并

3、對其進行了組織形態(tài)學描述、顯微特征描繪、皂苷類成分分離與結構鑒定，共分離提純了7個化合物，并通過光譜數(shù)據(jù)和化學分析鑒定其結構，其中包括4個新C<,21>甾體皂苷，分別為通光藤苷L(tenacissoside L，I)、通光藤苷M(tenacissoside M，Ⅱ)、通光藤苷N(tenacissoside N，Ⅲ)、通光藤苷O(tenacissoside O，Ⅳ)；--個已知C<,21>甾體皂苷，但首次從通光藤中分離得到，命名為通光藤苷

4、P(tenacissoside P.V)；以及2個已知化合物：胡蘿卜苷(daucosterol，VI)，β-谷甾醇(β-sitosterol，Ⅶ)。 2．通過MTT實驗(四甲基偶氮唑鹽還原反應)，對通光藤苷L-P進行體外活性測定，結果表明通光藤苷L-P對人肝癌細胞Bel-7402，人胃癌細胞SGC-790l，小鼠結腸癌細胞C-26以及小鼠肝癌細胞Heapal-6的生長均有抑制作用，并顯示出不同的敏感性；對正常的人胚腎細胞293和

5、人肝細胞L<,02>均無細胞毒性。采用流式細胞分析技術，觀察到70％乙醇沈脫部位可以誘導人胃癌細胞SGC-7901發(fā)生凋亡，細胞主要停留在G<,1>期，檢測到Sub-Gl峰，約占40．58％。 3．以川產通光藤為原料，對其皂苷的提取分離工藝進行了研究：采用水煎煮、兩次大孔吸附樹脂吸附一大孔離子交換樹脂純化的工藝，制得皂苷的收率約為1％，含量高于90％。以所得皂苷為原料，實驗了用冷凍干燥法生產凍干粉針劑的工藝并初步試制出通光藤皂苷