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文檔簡介
1、三黃瀉心湯是中醫(yī)藥經(jīng)典方劑,始載于《金匾要略》,由大黃、黃連、黃芩三味藥物組成,具有清熱瀉火、瀉熱消痞、暢通心下等癥治作用功效。對瀉心湯的現(xiàn)代藥效研究報道較多,表明其具有保護胃粘膜,抗體外血栓,改善微循環(huán),增強機體免疫,降低血脂等多種作用效果。
本實驗采用拆方研究的方法對瀉心湯及其單味藥物的主要活性成分的分離純化進行了比較研究。通過比較乙醇回流法、微波輔助法和酸堿溶劑提取法的提取率,篩選提取率較好的方法,再采用正交設(shè)計實驗
2、對影響提取率的各因素進行優(yōu)化,根據(jù)提取工藝優(yōu)化結(jié)果提取各組藥物有效成分;分別用沉淀法和大孔吸附樹脂純化法純化各組藥物提取液中的活性物質(zhì),去除雜質(zhì)類成分,得到純度較高的藥物樣品液。采用TLC 和HPLC 法對各樣品液中的主要組成成分進行分析和鑒定。再測定各組藥物樣品液清除自由基的作用效果。
實驗結(jié)果表明:
1. 瀉心湯的各有效成分采用乙醇回流法和堿水微波提取法的提取率最高,堿水提取液在純化上不易被樹脂吸附,因此
3、采用乙醇回流法提?。桓鲉挝端幬锝?jīng)比較后,乙醇回流提取的提取率均優(yōu)于其它方法,如大黃中蒽醌類物質(zhì)提取率達4.57%,黃連中的生物堿類物質(zhì)的提取率達8.51%,黃芩中的黃酮類物質(zhì)提取率達3.77%。
2. 各組提取液經(jīng)沉淀法和四種不同極性的樹脂純化后,大孔吸附樹脂柱層析法的效果優(yōu)于傳統(tǒng)的沉淀法,而四種大空樹脂中非極性的D101 樹脂純化效果較好,純化得率均達到80%以上,部分藥物成分純度略低于聚酰胺樹脂;其次是弱極性AB-8
4、樹脂純化效果較好,D301 樹脂和聚酰胺樹脂純化后,有效成分吸附解吸得率太低,使純化效果較差。
3. 各樣品液經(jīng)TLC 和HPLC 檢測后,與標準樣對照均含有多個有效組分,與資料基本相符合,但是各單方和復(fù)方相對應(yīng)的物質(zhì)含量有的差別較大,這與純化過程相關(guān),同時也與復(fù)方提取時的協(xié)同浸出作用有一定關(guān)系。復(fù)方和單位藥物鄰苯三酚法清除超氧陰離子自由的效果較好,黃連和瀉心湯的清除率較高,黃連0.4mg 生藥/ml 濃度的清除率達46.
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